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質(zhì)粒使用和保藏方法

發(fā)布時(shí)間:2021/12/8 10:51:36      閱讀次數(shù):4665

 質(zhì)粒使用和保藏方法

    1簡(jiǎn)要介紹
    本公司提供的質(zhì)粒有三種類型:質(zhì)粒、甘油菌和穿刺菌?蛻艨梢愿鶕(jù)自己的喜好自由選擇其中一種。質(zhì)粒形式:冰袋運(yùn)輸。長(zhǎng)期保存條件-20度。儲(chǔ)存時(shí)間長(zhǎng),可達(dá)到5年之久。需要轉(zhuǎn)化感受態(tài)細(xì)胞擴(kuò)增質(zhì)粒。甘油菌形式:常溫運(yùn)輸。長(zhǎng)期保存條件-80度。-80度條件下可以保存5年之久。可直接培育繁殖抽提質(zhì)粒。穿刺菌:常溫運(yùn)輸,可用順豐航空快遞,到貨時(shí)間快。保存條件為4-10度。保存時(shí)間6個(gè)月。可直接培育繁殖抽提質(zhì)粒。
    2使用方法
    質(zhì)粒形式使用方法:
    (1)制備轉(zhuǎn)化感受態(tài)細(xì)胞;(2)熱擊法轉(zhuǎn)化感受態(tài)細(xì)胞;(3)挑取單克隆,培養(yǎng)單克隆并抽提質(zhì)粒。
    甘油菌使用方法:
    (1)配置LB培養(yǎng)基,LB液體培養(yǎng)基配方:胰蛋白胨(Tryptone)10g/L酵母提取物(Yeastextract)5g/L氯化鈉(NaCl)10g/LpH7.4,滅菌后,加入相應(yīng)的抗生素;
    (2)接種100ul至1-3ml的含抗生素的培養(yǎng)基中,37度,220rpm培養(yǎng)18小時(shí)以上;
    (3)使用質(zhì)粒抽提試劑盒抽提質(zhì)粒。
    穿刺菌使用方法:
    (1)配置LB培養(yǎng)基,LB液體培養(yǎng)基配方:胰蛋白胨(Tryptone)10g/L酵母提取物(Yeastextract)5g/L氯化鈉(NaCl)10g/LpH7.4,滅菌后,加入相應(yīng)的抗生素;
    (2)接種100ul至1-3ml的含抗生素的培養(yǎng)基中,37度,220rpm培養(yǎng)18小時(shí)以上;
    (3)使用質(zhì)粒抽提試劑盒抽提質(zhì)粒。
    3菌種保藏方法:
    注意要做好含質(zhì)粒的菌種保藏工作,保存方法為甘油菌形式,-80度保藏。


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