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發(fā)布時間:2023/2/22 10:14:13 閱讀次數(shù):489
產(chǎn)品簡介:
紅細胞(Red blood cell,RBC)也稱紅血球,是血液中數(shù)量最多的一種血細胞,脊椎動物體內(nèi)通過RBC運送氧氣,RBC同時還具有免疫功能,在貧血檢查中可通過紅細胞滲透脆性試驗來檢測紅細胞膜的缺陷。
雅吉生物紅細胞孵育滲透脆性檢測試劑盒(比色法)(Erythrocyte Incubated OsmoticFragility Assay Kit)檢測原理是將患者血液置于37℃孵育24h,使紅細胞代謝繼續(xù)進行,由于葡萄糖的消耗,儲備的ATP減少,導(dǎo)致需要能量的紅細胞膜對陽離子的主動傳遞受阻,造成鈉離子在紅細胞內(nèi)聚集,細胞膨脹,孵育滲透脆性增加,某些有細胞膜缺陷以及某些酶缺陷的紅細胞的葡萄糖和ATP很快被耗盡時,孵育滲透脆性明顯增加,該實驗被稱為紅細胞孵育滲透脆性試驗,主要用于檢測人、動物血液的紅細胞孵育滲透脆性,并計算紅細胞中性脆性(MCF)。 該試劑盒僅用于科研領(lǐng)域,不適用于臨床診斷或其他用途。
產(chǎn)品組成:
名稱 | 50T | Storage |
試劑(A):NaCl Phosphate Buffer | 100ml | 4℃ |
試劑(B):ddH2O | 100ml | RT |
自備材料:
1、小試管
2、分光光度計
3、比色杯
操作步驟(僅供參考):
1、取肝素抗凝血2ml ,分成2份,1份立即實驗,另1份密閉37C孵育24h后再作實驗。
2、取小試管或恰當(dāng)容器,依次編號,按照下表稀釋成不同濃度。每次檢查應(yīng)設(shè)正常對照。
試管號 | 1 | 2 | 3 | 4 | 5 | 6 | 7 | 8 | 9 | 10 | 11 | 12 | 13 |
試劑A(ml) | 3.4 | 3.0 | 2.8 | 2.6 | 2.4 | 2.2 | 2.0 | 1.8 | 1.6 | 1.4 | 1.2 | 0.8 | 0.4 |
試劑B(ml) | 0.6 | 1 | 1.2 | 1.4 | 1.6 | 1.8 | 2.0 | 2.2 | 2.4 | 2.6 | 2.8 | 3.2 | 3.6 |
NACL濃度(g/L) | 8.5 | 7.5 | 7.0 | 6.5 | 6.0 | 5.5 | 5.0 | 4.5 | 4.0 | 3.5 | 3.0 | 2.0 | 1.0 |
3、分別吸取40μl肝素抗凝血加入上述NaCI稀釋液中輕輕混勻,室溫(20°C)靜置30min。
4、將各管再次混勻1次,離心沉淀5min,取上清液。
5、用分光光度計檢測540nm波長,以NaCI Phosphate Buffer 作為空白管調(diào)零,測定
各溶血管的吸光度。
6、計算溶血百分率∶以1g/L NaCl完全溶血管的吸光度為100%,計算相應(yīng)氯化鈉濃度
的溶血百分率。溶血百分率(%)=各管吸光值/100%溶血管吸光值×100。
7、計算紅細胞中性脆性(MCF)∶以溶血百分率為縱坐標(biāo),以氯化鈉濃度為橫坐標(biāo),作溶血
曲線圖,即為紅細胞鹽水滲透脆性曲線。在曲線上,50%溶血的氯化鈉濃度為紅細胞中性脆性(MCF)。
參考區(qū)間︰
未孵育,50%溶血氯化鈉濃度 | 4.00~4.45g/L |
37℃孵育24H,50%溶血氯化鈉濃度 | 4.46~5.9g/L |
注意事項:
1、每次檢查應(yīng)設(shè)正常對照。
2、NaCl Phosphate Buffer pH值及溫度必須恒定,pH改變0.1或溫度改變5%,均可
使結(jié)果偏差0.01%。
3、NaCl Phosphate Buffer采用高純度氯化鈉配制,普通氯化鈉不宜采用。
4、NaCl Phosphate Buffer不要被酸堿污染,同時注意密閉保存。
5、血液樣品應(yīng)直接滴入液體,不宜沿管壁流入。
6、為了您的安全和健康,請穿實驗服并戴一次性手套操作。
有效期∶12個月有效,4℃保存。
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