在人類(lèi)中，兒茶酚胺類(lèi)物質(zhì)如腎上腺素（epinephrine）、去甲腎上腺素（norepinephrine）和多巴胺是交感神經(jīng)系統(tǒng)的神經(jīng)遞質(zhì)，參與許多生理過(guò)程。交感神經(jīng)系統(tǒng)使身體處于高度警戒狀態(tài)，也被稱(chēng)為身體的戰(zhàn)斗或逃跑反應(yīng)。此外，兒茶酚胺及其代謝產(chǎn)物表明了身體對(duì)急性和慢性壓力的適應(yīng)。

Bi-CAT(腎上腺素和去甲腎上腺素)ELISA內(nèi)容：

1.密封箔-即用型

內(nèi)容：密封箔，包裝在可重新密封的袋中

體積：2x4箔

2.洗滌緩沖液濃縮液-濃縮50倍

內(nèi)容：含有非離子洗滌劑和生理pH值的緩沖液

體積：2x20mL/瓶，紫色瓶蓋

3.酶結(jié)合物-即用型

內(nèi)容：山羊抗兔免疫球蛋白，與過(guò)氧化物酶結(jié)合

體積：2x12mL/瓶，紅色瓶蓋

4.底物-即用型

內(nèi)容：含有3,3',5,5'-四甲基聯(lián)苯胺的顯色底物，底物緩沖液和過(guò)氧化氫

體積：2x12mL/瓶，黑色瓶蓋

5.終止液-即用型

內(nèi)容：0.25M硫酸

體積：2x12mL/瓶，灰色瓶蓋

6.腎上腺素微孔板條-即用型

內(nèi)容：1x96孔（12x8）預(yù)涂抗原微孔板，包裝在可重新密封的藍(lán)色袋中，含干燥劑

7.去甲腎上腺素微孔板條-即用型

內(nèi)容：1x96孔（12x8）預(yù)涂抗原微孔板，包裝在可重新密封的黃色袋中，含干燥劑

8.腎上腺素抗血清-即用型

內(nèi)容：含有蛋白質(zhì)（牛）和非汞防腐劑的兔抗腎上腺素抗體，藍(lán)色

體積：1x6mL/瓶，藍(lán)色瓶蓋

9.去甲腎上腺素抗血清-即用型

內(nèi)容：含有蛋白質(zhì)（牛）和非汞防腐劑的兔抗去甲腎上腺素抗體，黃色

體積：1x6mL/瓶，黃色瓶蓋

10.調(diào)整緩沖液-即用型

內(nèi)容：TRIS緩沖液

體積：1x4mL/瓶，綠色瓶蓋

Bi-CAT(腎上腺素和去甲腎上腺素)ELISA預(yù)期用途和原理：

Bi-CAT酶免疫測(cè)定用于人血漿和尿液中腎上腺素（epinephrine）和去甲腎上腺素（norepinephrine）的定量測(cè)定。僅限研究使用，不用于診斷程序。

腎上腺素（epinephrine）和去甲腎上腺素（norepinephrine）通過(guò)使用順式二醇特異性親和凝膠進(jìn)行提取，然后進(jìn)行酰化，并隨后進(jìn)行酶促轉(zhuǎn)化。競(jìng)爭(zhēng)ELISA試劑盒使用微孔板格式�？乖�綁定到微孔板的固相上。�；�的標(biāo)準(zhǔn)品、對(duì)照品和樣品與固相結(jié)合的分析物競(jìng)爭(zhēng)有限的抗體結(jié)合位點(diǎn)。系統(tǒng)達(dá)到平衡后，通過(guò)洗滌去除游離抗原和游離抗原-抗體復(fù)合物。使用TMB作為底物，通過(guò)抗兔IgG-過(guò)氧化物酶結(jié)合物檢測(cè)固相上結(jié)合的抗體，產(chǎn)生顏色反應(yīng)。在450nm處監(jiān)測(cè)反應(yīng)。通過(guò)將未知樣品的吸光度與已知標(biāo)準(zhǔn)濃度的標(biāo)準(zhǔn)曲線(xiàn)進(jìn)行比較，實(shí)現(xiàn)未知樣品的定量。建議手動(dòng)處理ELISA。自動(dòng)化實(shí)驗(yàn)室設(shè)備的驗(yàn)證是用戶(hù)的責(zé)任。

樣品收集和儲(chǔ)存：

血漿

應(yīng)該將全血收集到含有EDTA作為抗凝劑的離心管中，并在收集后立即按照制造商的說(shuō)明進(jìn)行離心。

如果出現(xiàn)溶血、黃疸或脂血的樣品，參見(jiàn)2.2.1節(jié)。

儲(chǔ)存：在2-8°C下最長(zhǎng)儲(chǔ)存6小時(shí)，較長(zhǎng)時(shí)間（最長(zhǎng)6個(gè)月）在-20°C下儲(chǔ)存。

應(yīng)避免反復(fù)凍融。

尿液

可以使用自發(fā)尿液或24小時(shí)尿液，收集在含有10-15毫升6M鹽酸的瓶中。

如果使用24小時(shí)尿液，請(qǐng)記錄收集的尿液總量。

儲(chǔ)存：在2-8°C下最長(zhǎng)儲(chǔ)存48小時(shí)，在室溫下最長(zhǎng)儲(chǔ)存24小時(shí)，較長(zhǎng)時(shí)間（最長(zhǎng)6個(gè)月）在-20°C下儲(chǔ)存。

應(yīng)避免反復(fù)凍融。

避免直接暴露在陽(yáng)光下。

測(cè)試程序：

使用前讓所有試劑和樣品達(dá)到室溫，并輕輕倒置充分混合。

標(biāo)記提取板和微孔板（從框架中取出使用的微孔條應(yīng)相應(yīng)標(biāo)記，以避免混淆）。

建議進(jìn)行雙重測(cè)定。

建議在微孔板使用前對(duì)微孔條進(jìn)行編號(hào)，以避免混淆。

抗血清的結(jié)合、酶結(jié)合物的結(jié)合以及酶的活性都與溫度有關(guān)。

溫度越高，吸光度值越高。

不同的孵育時(shí)間對(duì)吸光度也有類(lèi)似的影響。

酶免疫測(cè)定過(guò)程中的最佳溫度在20-25°C之間。

注意：使用振幅約為3毫米、大約600轉(zhuǎn)/分鐘的微孔板振蕩器是強(qiáng)制性的。

不同設(shè)置的振蕩可能會(huì)影響結(jié)果。

注意：如果出現(xiàn)溢出，在使用設(shè)置為405納米的微孔板讀取器讀取孔中溶液的吸光度，需在10分鐘內(nèi)完成。

典型標(biāo)準(zhǔn)曲線(xiàn)示例，請(qǐng)勿用于計(jì)算！

Bi-CAT(腎上腺素和去甲腎上腺素)ELISA文獻(xiàn)參考：

(1) Kim et al. Vitamin C prevents stress-induced damage on the heart caused by the death of

cardiomyocytes, through the down-regulation of the excessive production of

catecholamine, TNF-α, and ROS production in GULO(-I-) Vit C-Insufficient mice. Free

Radical Biology and Medicine, 65:573-583 (2013)

(2) Bada et al. Peripheral vasodilatation determines cardiac output in exercising humans: insight

from atrial pacing. The Journal of Physiology, 590(8):2051-2060 (2012)

(3) Parks et al. Employment and work schedule are related to telomere length in women.

Occupational & Environmental Medicine 68(8):582-589 (2011)