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發(fā)布時間：2024/9/27 8:57:42 閱讀次數(shù)：123
超敏胰島素ELISA用于定量測定人血清和血漿中的胰島素。
超靈敏胰島素ELISA（ALP-80-INSHUU-E01.1）檢測原理：
超敏胰島素ELISA是一種夾心型免疫分析法。96孔微孔板被涂覆有特異性針對胰島素的單克隆抗體。標準品、樣本和對照品與檢測抗體一起加入微孔板孔中。然后，微孔板在室溫下放置在微孔板振蕩器上，以700-900轉(zhuǎn)每分鐘的速度振蕩。第一次孵育完成后，孔被洗滌緩沖液清洗并吸干。加入TMB底物，然后微孔板再次在室溫下以700-900轉(zhuǎn)每分鐘的速度振蕩。第二次孵育完成后，加入停止液，并通過分光光度計在450納米處測量光密度（OD）。生成的顏色強度與樣本中胰島素的含量成正比。
注意事項
1. 本試劑盒中包含的人血制品已檢測是否含有HIV（人類免疫缺陷病毒）、HBV（乙型肝炎病毒）和HCV（丙型肝炎病毒）。這些病毒的檢測方法不能保證病毒的絕對不存在；因此，所有試劑應被視為潛在傳染性物質(zhì)。處理和處置應符合所有適當?shù)膰液偷胤椒ㄒ?guī)，以處理潛在的生物危害物質(zhì)。
2. 所有來自動物源的材料均為BSE（瘋牛�。╆幮�。然而，所有材料應被視為潛在傳染性物質(zhì)。
3. 避免直接接觸皮膚。
4. 本產(chǎn)品不得內(nèi)服。
5. 使用本產(chǎn)品時，避免進食、飲水或吸煙。
6. 不要使用口吸移液管吸取任何試劑。
7. 試劑盒中的試劑是特定批次的，不得替換。
8. 不要使用超過有效期的試劑。
9. 不建議更改測試程序，可能會影響測試結果。
試劑準備
所有試劑在使用前必須平衡至室溫。洗滌緩沖液濃縮液需用20份蒸餾水稀釋。例如，要準備工作強度洗滌緩沖液，用400毫升去離子水稀釋20毫升洗滌緩沖液濃縮液（21倍）。工作強度洗滌緩沖液在室溫（18-25°C）下穩(wěn)定4周。
糖尿病控制（1級）以凍干形式提供。請參考每個試劑盒附帶的分析證明，以獲取重懸的適當體積的去離子水。用橡膠塞和瓶蓋封閉小瓶，輕輕搖晃小瓶，并在使用前讓其靜置30分鐘。小瓶中的內(nèi)容物應完全溶解，無可見顆粒。重懸的對照品在2-8°C下儲存1天是穩(wěn)定的。如果需要，對照品可以分裝后在-20°C下儲存長達6個月。對照品不應反復凍融。
超靈敏胰島素ELISA結果計算
根據(jù)標準品構建標準曲線。零標準品應作為空白，其平均值應從每個孔中減去。建議使用軟件程序來計算標準曲線并確定樣本的濃度。超敏胰島素ELISA是一種配體結合測定，其響應與分析物濃度呈S形關系。目前接受的此類曲線的參考模型使用4或5參數(shù)邏輯（pl）擬合，因為這些模型在更大范圍內(nèi)優(yōu)化了準確性和精確性。盡管三次樣條和其他模型是可接受的方法，但它們通常在范圍的低端和高端顯示出較低的內(nèi)部檢測準確性和精確性。
在以下示例中，使用了5參數(shù)邏輯曲線擬合來最大化低濃度樣本的準確性和精確性。然而，由于個別實驗室條件的影響，所有模型在可檢測范圍的最低端和最高端的準確性和精確性都是有限的。因此，在解釋分析物響應變得非線性的結果時，應始終謹慎。
典型標準曲線：
以下結果僅用于演示目的，不能代替測定獲得的數(shù)據(jù)。每次分析運行和平板測試都必須繪制標準曲線
預期值
超敏胰島素ELISA是參照世界衛(wèi)生組織胰島素第一國際參考制劑（IRP）66/304進行校準的。先前的研究確定正常的胰島素范圍為5 – 25 ?IU/mL。建議每個實驗室為各自的患者群體建立自己的正常范圍。
單位換算
將人胰島素從國際單位（IU）轉(zhuǎn)換為克的換算關系為：1 IU人胰島素 = 6 nmol = 34.8 ?g胰島素。
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