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懸浮細(xì)胞HP-1的培養(yǎng)方法

發(fā)布時(shí)間：2023/5/26 8:44:58      閱讀次數(shù)：615

 懸浮細(xì)胞HP-1的培養(yǎng)方法,培養(yǎng)條件：

RPMI-1640＋10% FBS＋0.05mM β-巰基乙醇＋1% 雙抗

到貨處理

用75%酒精棉球擦拭 T25 細(xì)胞培養(yǎng)瓶外部,觀察細(xì)胞生長(zhǎng)情況.

  • 1.不要打開(kāi)培養(yǎng)瓶蓋,將細(xì)胞放入 37℃培養(yǎng)箱中靜置 3-4 小時(shí)后再做處理,以穩(wěn)定細(xì)胞狀態(tài).

 

  • 2.通過(guò)離心的方式收集細(xì)胞,然后將細(xì)胞沉淀加入5-8ml的完全培養(yǎng)基輕輕吹打均勻后移入新的T25培養(yǎng)瓶中培養(yǎng).

 

 

 

 

 

 懸浮細(xì)胞HP-1的培養(yǎng)方法,培養(yǎng)時(shí)的注意技巧

 

  1. 換液前將培養(yǎng)瓶豎在培養(yǎng)箱靜置1小時(shí)左右,輕輕吸掉3ml左右培養(yǎng)基,然后加入3ml的新鮮完全培養(yǎng)基,混勻后放入培養(yǎng)箱中培養(yǎng).

     

 

2.如果細(xì)胞密度比較稀,培養(yǎng)基沒(méi)有明顯變化,可以加入500ul的FBS混勻后,豎著培養(yǎng).

 

3.傳代時(shí),先按照換液步驟處理,吸掉3ml左右培養(yǎng)基后,加入10ml的新鮮完全培養(yǎng)基,混勻后分2個(gè)T25培養(yǎng)瓶培養(yǎng).

 

4.培養(yǎng)一周左右可以離心一次,以去除一些死細(xì)胞.

 

5.該細(xì)胞比較脆弱,培養(yǎng)過(guò)程中不要頻繁拿出來(lái)觀察,以免影響細(xì)胞的生長(zhǎng).

 

6.該細(xì)胞的生長(zhǎng)環(huán)境比較敏感,需使用較好的血清培養(yǎng).

 

7.建議使用未TC處理的瓶或者皿培養(yǎng).


訂購(gòu)建議：

為避免收到細(xì)胞后離心處理,推薦使用15ml離心管發(fā)貨,

到貨后直接分裝到2個(gè)T25培養(yǎng)瓶即可. 懸浮細(xì)胞HP-1的培養(yǎng)方法,

 

 


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