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發(fā)布時間：2023/6/14 9:06:37 閱讀次數(shù)：832
細(xì)胞培養(yǎng)的準(zhǔn)備工作,細(xì)胞培養(yǎng)已經(jīng)發(fā)展成了一項多元化技術(shù),各種培養(yǎng)技術(shù)如雨后春筍般出現(xiàn),并被廣泛應(yīng)用于基礎(chǔ)研究 診斷 醫(yī)學(xué) 生物技術(shù)等領(lǐng)域.在細(xì)胞培養(yǎng)過程中,最基礎(chǔ)最重要的還是無菌技術(shù),我們將從以下2個方面與大家分享細(xì)胞培養(yǎng)要注意的一些無菌技術(shù).
一 無菌環(huán)境
1 層流柜：這些年來,由于層流柜 過濾空調(diào)機(jī)的引入,已經(jīng)為細(xì)胞培養(yǎng)創(chuàng)造出了更簡單 更可靠的無菌環(huán)境,在層流柜內(nèi)工作的主要優(yōu)點是：可提供持續(xù) 穩(wěn)定的過濾氣流通過工作臺面,避免工作空間受到灰塵污染.
在使用層流柜進(jìn)行細(xì)胞培養(yǎng)時,要定期對過濾器進(jìn)行維護(hù)檢查,一般情況下,每3-6個月檢查一次初效過濾器,每6個月檢查一次高效過濾器.初效過濾器可以在關(guān)掉風(fēng)機(jī)后,拆卸清洗或者更換新的初效過濾器；高效過濾器要對氣流情況和孔數(shù)進(jìn)行周期性的監(jiān)測,若高效過濾器需要更換,最好由專業(yè)的工程師來完成.
2 操作臺：作為細(xì)胞培養(yǎng)實驗的主要“戰(zhàn)場”,必須保持干凈整潔.每次實驗前要用70%乙醇充分擦洗工作臺面,移入操作臺的每個物品,均要用70%乙醇進(jìn)行擦拭消毒；實驗中若有溢出物,應(yīng)立即擦去,并用70%乙醇擦拭該區(qū)域；實驗后,移除所有物品并再次擦洗操作臺.還要定期打掃操作臺下方空間,建議每周至少一次.
3 其他：操作細(xì)胞培養(yǎng)物,要注重個人衛(wèi)生,穿戴個人防護(hù)設(shè)備,既可保護(hù)操作者不受培養(yǎng)物帶來的傷害,也可保護(hù)培養(yǎng)物免受操作者帶來的污染.無塵服可以降低皮屑及衣服上污物和灰塵污染培養(yǎng)物的可能.手套可以降低接觸敏感性,為操作者提供保護(hù),并且比裸露的皮膚更容易保持清潔,在接觸和使用共用設(shè)備時,手套的無菌性會大大降低,所以要經(jīng)常用70%乙醇擦拭.
二 無菌操作
1 在細(xì)胞實驗開始前,用70%乙醇擦拭工作臺表面和將要放入工作臺的所有物品,擦拭時,有時會擦掉物品表面的標(biāo)記,所以要使用抗乙醇的記號筆.
2 切勿碰觸吸管尖頭部位以及容器瓶口,不要在開口容器的正上方進(jìn)行實驗.容器打開后,將瓶身傾斜約45°角取用,盡量不要把瓶蓋蓋口朝上放置在工作臺面上,避免瓶蓋被污染.
3 每次操作只處理一株細(xì)胞株,避免不同細(xì)胞株之間出現(xiàn)交叉污染.
4 不可直接將液體從一個無菌容器中倒入另一個無菌容器,因為在倒液過程中,會在試劑瓶內(nèi)外兩側(cè)之間形成一個液體橋,有可能會使污染物進(jìn)入試劑瓶內(nèi).細(xì)胞培養(yǎng)的準(zhǔn)備工作
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