細(xì)胞來源
JCRB
細(xì)胞檢測(cè)
細(xì)胞不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細(xì)菌、酵母和真菌
傳代方法
建議1:2-1:3 兩天換液一次
備注
該細(xì)胞已通過STR。
組織來源：口腔（Oral cavity）
疾�。荷圜[狀細(xì)胞癌（Tongue squamous cell carcinoma）
年齡：69歲（69 years）
培養(yǎng)體系：該細(xì)胞系培養(yǎng)所用基本培養(yǎng)基為 DMEM/F12,配置完全培養(yǎng)基時(shí)需加入 10%FBS，1%Anti-Anti。
建議同時(shí)購(gòu)買完培，同時(shí)購(gòu)買非常優(yōu)惠
細(xì)胞收到后處理：
收到細(xì)胞，請(qǐng)查看瓶子是否有破裂，培養(yǎng)基是否漏出，是否渾濁，如有請(qǐng)盡快和我們聯(lián)系。如包裝完好，取出25cm2培養(yǎng)瓶，75%酒精消毒,拆下封口膜,在顯微鏡下觀察細(xì)胞形態(tài)是否正常，細(xì)胞的貼壁情況以及細(xì)胞密度,然后放入37℃，5%CO2細(xì)胞培養(yǎng)箱中靜置2-3小時(shí)，以穩(wěn)定細(xì)胞狀態(tài)。
細(xì)胞培養(yǎng)步驟：
1）復(fù)蘇細(xì)胞：將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍，加入5mL培養(yǎng)基混合均勻。在1000RPM條件下離心5分鐘，棄去上清液，補(bǔ)加4-6mL完全培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液加入培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜（或?qū)⒓?xì)胞懸液加入6cm皿中），培養(yǎng)過夜。第二天換液并檢查細(xì)胞密度。
2）細(xì)胞傳代：如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%，即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。
1、對(duì)于貼壁細(xì)胞，傳代可參考以下方法：
1. 棄去培養(yǎng)上清，用不含鈣、鎂離子的PBS潤(rùn)洗細(xì)胞1-2次。
2. 加1-2ml消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培養(yǎng)瓶中，置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2min，然后在顯微鏡下觀察細(xì)胞消化情況，若細(xì)胞大部分變圓并脫落，迅速拿回操作臺(tái)，輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加5ml以上含10%血清的完全培養(yǎng)基終止消化。
3.輕輕吹打細(xì)胞，完全脫落后吸出，在1000RPM條件下離心8-10分鐘，棄去上清液，補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻。
4. 按5-6ml/瓶補(bǔ)加培養(yǎng)液，將細(xì)胞懸液按1：2到1：5的比例分到新的含5-6 ml培養(yǎng)液的新皿中或者瓶中。
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