廣義上來說,凡是細胞培養(yǎng)體系中的外來成分或成分變化,都應(yīng)視為污染,細胞污染不能完全被消除,但能減少其發(fā)生的頻率和后果的嚴重性。細胞污染根據(jù)污染源主要可以分為物理性,化學(xué)性和生物性污染。
支原體污染:支原體是一種大小介于細菌和病毒之間(最小直徑0.2um)并獨立生活的微生物,約有1%可通過濾菌器。支原體無細胞壁形態(tài)呈高度多形性,可為圓形、絲狀或梨形,在光境下不易看清內(nèi)部結(jié)構(gòu)。多數(shù)支原體適合于偏堿條件下生存(PH7.6—8.0),對酸耐受性差,對熱比較敏感,對一般抗生素不敏感。支原體污染細胞后,培養(yǎng)液一般不發(fā)生混濁,多數(shù)情況下細胞病理變化輕微或不顯著,細微變化也可由于傳代、換液而緩解,因此易被忽視。但個別嚴重情況,可致細胞增殖緩慢,甚至從培養(yǎng)器皿脫落。如何確定是否有支原體污染,一般可用培養(yǎng)法或熒光染色法檢測,市場上有多種支原體檢測的試劑盒,本人試用過幾種,先達基因(gendx.cn)的ERA法支原體快速檢測試劑盒還不錯,兩步操作,20min出結(jié)果,靈敏度較高、速度比較快、操作簡單靈敏,可檢出的支原體覆蓋范圍非常比較廣,超過130(亞)種。
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