產(chǎn)品簡介:
MycoTest Kit是利用降落聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)技術(shù)(TD-PCR)對支原體16S rRNA 基因高度保守區(qū)域特異性片段進(jìn)行擴(kuò)增檢測。該方法靈敏度高,特異性強(qiáng),可用于各種生物材料(如細(xì)胞培養(yǎng)基、實驗動物分泌物、動物血清等)支原體感染的檢測。
產(chǎn)品規(guī)格:
組分/貨號 | C5002(50 rxns) | C5001(20 rxns) |
Mix | 3*500 μL | 600 μL |
Positive | 56 μL | 22 μL |
常見支原體種類:
支原體種類 | 中文名稱 | PCR條帶大小 |
M. orale | 口腔支原體 | 462 bp |
M. hyorhinis | 豬鼻支原體 | 464 bp |
A. laidlawii | 萊氏無膽甾原體 | 438 bp |
M. salivarium | 唾液支原體 | 466 bp |
M. arginini | 精氨酸支原體 | 465 bp |
M. fermentans | 發(fā)酵支原體 | 461 bp |
M. hominis | 人型支原體 | 463 bp |
M.pneumoniae | 肺炎支原體 | 470 bp |
運(yùn)輸方式:4℃
儲存條件及有效期:4℃ ,1個月;-20℃,18個月。
操作步驟:
待檢樣品,直接取2 μL上清液作為PCR模板;
(注:懸浮細(xì)胞需要1000 rpm 離心4 min)
反應(yīng)體系配置:
無菌水 | 19 μL |
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Mix | 29 μL |
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樣品/對照 | 2 μL |
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PCR反應(yīng)程序:
94 ℃ | 90 s |
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94 ℃ 70-61 ℃ 72 ℃ | 30 s 30 s 45 s |
20 cycles(每2個循環(huán)降1℃,或者每1個循環(huán)降0.5℃。) |
94 ℃ 60 ℃ 72 ℃ | 30 s 30 s 45 s |
20個循環(huán) |
72 ℃ | 4 min |
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4. 取5ul PCR擴(kuò)增產(chǎn)物,使用1%瓊脂糖凝膠電泳檢測PCR結(jié)果。
結(jié)果分析: