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呋喃西林檢測卡

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  呋喃西林檢測卡

使用說明書

(膠體金法)

 

 1 原理及用途

本產(chǎn)品應(yīng)用競爭抑制膠體金免疫層析的原理制成,用于檢測蜂蜜、組織、肝臟等樣本中的呋喃西林代謝物SEM。

樣本溶液滴入檢測卡的加樣孔后,樣本溶液中的呋喃西林代謝物與金標(biāo)抗體相結(jié)合,從而阻止金標(biāo)抗體與纖維素膜上呋喃西林偶聯(lián)物結(jié)合。當(dāng)樣本溶液中的呋喃西林代謝物含量大于檢測限時(shí)檢測線不顯色(或顯色比對照線淺),結(jié)果為陽性;當(dāng)樣本溶液中呋喃西林代謝物含量小于檢測限時(shí)檢測線顯紫紅色(顯色與對照線一致或更深),結(jié)果為陰性。

2 技術(shù)指標(biāo)

2.1 試劑卡靈敏度:1ppb(ng/ml)

    對樣本的最終檢測限須以試劑卡靈敏度乘以樣本處理的稀釋比例。

2.2 樣本檢測下限:

蜂蜜、組織、腸衣、肝臟……………………0.5ppb

3 試劑盒組成

檢測卡…………………50個(gè)/盒

樣本復(fù)溶液………………1瓶

衍生化試劑……………………3瓶

說明書…………………………1份

4 需要的器材和試劑

4.1 儀器:均質(zhì)器 、氮?dú)獯蹈裳b置、振蕩器、離心機(jī)、刻度移液管、天平(感量0.01g)

4.2 微量移液器:單道20µl-200µl,100µl-1000µl

4.3試劑:乙酸乙酯、正己烷、氫氧化鈉、濃HCl、K2HPO4·3H2O

5 樣本前處理

5.1 樣本處理前須知:

實(shí)驗(yàn)器具必須潔凈并使用一次性吸頭,以避免污染干擾實(shí)驗(yàn)結(jié)果。

5.2 配液:

配液1:0.5M  K2HPO4 溶液

    11.4g K2HPO4▪3H2O加去離子水溶解定溶至100ml。

配液2:1M  HCL

    8.6mL濃HCL加去離子水定容至100mL。

配液3:1M  NaOH溶液

    稱取4g NaOH,加去離子水定容至100ml

5.3蜂蜜、組織、腸衣、肝臟樣本處理方法

1)稱取2±0.05g均質(zhì)樣本于離心管中,加入4ml去離子水、0.5 ml 1M 鹽酸溶液和600μl衍生化試劑,振蕩5分鐘;

2)65℃水浴孵育30分鐘;

3)分別加入1ml 0.5M K2HPO4溶液,0.4ml 1M NaOH溶液和5ml的乙酸乙酯,振蕩5分鐘;

4)室溫下4000轉(zhuǎn)/分,離心5分鐘;

5)取出2.5ml的上層液到另一個(gè)離心管中,50-60℃氮?dú)饣蚩諝獯蹈桑?/span>

6)用1ml正已烷溶解殘留物,加入0.5ml復(fù)溶液充分振蕩混合30秒;室溫4000轉(zhuǎn)/分,離心5分鐘;

7)上層為正已烷,取下層樣本液用于分析。

濃縮倍數(shù)為:2    檢測下限:0.5ppb

6 實(shí)驗(yàn)步驟

6.1 撕開檢測卡鋁箔包裝袋,取出檢測卡,放于平整、潔凈的臺(tái)面上。

6.2 用配套吸管吸取已準(zhǔn)備好的樣本液體,緩慢、逐滴的(應(yīng)避免泡沫產(chǎn)生)滴加2-3滴(約60ul)到加樣孔(S)內(nèi)。

6.3 室溫下放置8-10分鐘判斷結(jié)果。超過10分鐘的結(jié)果只能作為參考。

7 結(jié)果判斷

陰性(-):C線顯紅色,T線比C線顯色深或者一樣深,表示樣本中呋喃西林濃度低于檢測下限,或不含有。

陽性(+):C線顯紅色,T線比C線顯色淺或者不顯色,則表示樣本中呋喃西林濃度高于檢測下限。

無效:未出現(xiàn)質(zhì)控C線,表明操作過程不正確或檢測卡已失效。


8 注意事項(xiàng)

8.1 過期或鋁箔袋破損的產(chǎn)品,均不可使用。

8.2 檢測卡從冰箱中取出時(shí)應(yīng)恢復(fù)到室溫后打開,打開的檢測卡應(yīng)盡快使用以免受潮后失效。

8.3 不要觸摸檢測卡中央的白色膜面。

8.4 取液滴管不可混用,以免交叉污染。

8.5 待檢樣品溶液需清亮、無混濁顆粒、無細(xì)菌污染,否則容易導(dǎo)致阻塞、顯色不明顯等異,F(xiàn)象,從而影響實(shí)驗(yàn)結(jié)果的判定。

9 貯藏及保存期

儲(chǔ)藏條件:試劑盒于2-30℃干燥環(huán)境下保存。

 質(zhì) 期:該產(chǎn)品有效期為1年,生產(chǎn)日期見包裝盒。

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