Tubulin-Tracker Red是一種Tubulin紅色熒光探針,可以用于培養(yǎng)細(xì)胞或組織切片的Tubulin特異性熒光染色。
Tubulin-Tracker Red探針為熒光染料Alexa Fluor 555標(biāo)記的抗α-Tubulin小鼠單克隆抗體(克隆號(hào)為DM1A),可以識(shí)別α-Tubulin的425-450aa。可以用于人、小鼠、大鼠、牛、豬、豚鼠和禽類(avian)樣品α-Tubulin的檢測(cè)。最大激發(fā)波長(zhǎng)為555nm,最大發(fā)射波長(zhǎng)為565nm。Alexa Fluor 555的熒光光譜和Cy3非常接近,可以用Cy3的檢測(cè)條件進(jìn)行檢測(cè)。
本產(chǎn)品可以用于細(xì)胞或組織內(nèi)的微管(microtubule)的熒光檢測(cè)?梢杂糜跓晒怙@微鏡觀察,也可用于流式細(xì)胞儀檢測(cè)。使用本產(chǎn)品染色細(xì)胞內(nèi)微管的效果參考圖1。
圖1. Tubulin-Tracker Red對(duì)NRK-52E細(xì)胞(大鼠腎小管上皮細(xì)胞)的染色效果。DAPI 染色的NRK-52E細(xì)胞其細(xì)胞核呈現(xiàn)藍(lán)色熒光; Tubulin-Tracker Red染色的NRK-52E細(xì)胞,微管呈現(xiàn)紅色熒光。
本產(chǎn)品使用時(shí)的推薦稀釋比例為1:50-100,共可以配制2-4ml染色液。如果每個(gè)片子需要使用100µl染色工作液,每個(gè)包裝的本產(chǎn)品足夠用于20-40個(gè)片子的染色。
包裝清單:
產(chǎn)品編號(hào) | 產(chǎn)品名稱 | 包裝 |
C1050 | Tubulin-Tracker Red(抗體法微管紅色熒光探針) | 40µl |
- | 說明書 | 1份 |
保存條件:
-20℃避光保存,1年有效。
注意事項(xiàng):
對(duì)于微量的液體,每次使用前先離心數(shù)秒鐘,使液體充分沉降到管底。
熒光染料均存在淬滅問題,請(qǐng)盡量注意避光,以減緩熒光淬滅。
需自備蓋玻片和載玻片(可以向雅吉訂購(gòu))。
本產(chǎn)品僅限于專業(yè)人員的科學(xué)研究用,不得用于臨床診斷或治療,不得用于食品或藥品,不得存放于普通住宅內(nèi)。
為了您的安全和健康,請(qǐng)穿實(shí)驗(yàn)服并戴一次性手套操作。
使用說明:
1.固定細(xì)胞或組織切片的熒光染色:
a.用PBS洗滌細(xì)胞或組織切片2次。
b.用雅吉的免疫染色固定液(P0098)或PBS配制的3.7%甲醛溶液室溫固定細(xì)胞或組織切片約10-20分鐘。
c.用雅吉的免疫染色洗滌液(P0106)或含0.1% Triton X-100的PBS洗滌2-3次,每次5分鐘。
d.用雅吉的免疫熒光染色二抗稀釋液(P0108)或含有1-5%BSA和0.1% Triton X-100的PBS按照1:50-100的比例稀釋Tubulin-Tracker Red,例如4µl Tubulin-Tracker Red用0.2ml或0.4ml稀釋液稀釋,稀釋后的溶液即為Tubulin-Tracker Red染色工作液。稀釋比例可以根據(jù)實(shí)際染色效果進(jìn)行適當(dāng)調(diào)整。
e.把Tubulin-tracker Red染色工作液按照約每個(gè)片子100µl的比例滴加到片子上,室溫避光孵育30-60分鐘。為防止蒸發(fā),孵育時(shí)最好將片子置于載玻片染色盒中,載玻片染色盒(FSR958)可以向雅吉訂購(gòu)。
f.用雅吉的免疫染色洗滌液(P0106) 或含0.1% Triton X-100的PBS洗滌2-4次,每次5分鐘。
g.隨后可以直接用熒光顯微鏡進(jìn)行觀察。也可以用抗熒光淬滅封片液封片后保存和觀察。
2.流式細(xì)胞儀檢測(cè):
a.每個(gè)樣品收集約20-50萬細(xì)胞。
b.PBS洗滌一次。
c.用雅吉的免疫染色固定液(P0098)或PBS配制的3.7%甲醛溶液室溫固定細(xì)胞約10-20分鐘。
d.用雅吉的免疫染色洗滌液(P0106)或含0.1% Triton X-100的PBS洗滌2-3次,每次5分鐘。
e.用雅吉的免疫熒光染色二抗稀釋液(P0108)或含有1-5%BSA和0.1% Triton X-100的PBS重懸細(xì)胞,然后按照1:50-100的比例加入Tubulin-Tracker Red。例如1µl Tubulin-Tracker Red加入到50-100µl細(xì)胞懸液中。Tubulin-Tracker Red稀釋比例可以根據(jù)實(shí)際染色效果進(jìn)行適當(dāng)調(diào)整。
f.室溫避光孵育1小時(shí)。
g.用雅吉的免疫染色洗滌液(P0106)或含0.1% Triton X-100的PBS洗滌2-3次,每次5分鐘。隨后即可進(jìn)行流式細(xì)胞儀分析。