WB, Western blot; IP, Immunoprecipitation; IF, Immunofluorescence; F, Flow cytometry.
H, human; M, mouse; R, rat.
本Cytochrome C抗體(Cytochrome C antibody,細胞色素C抗體)為進口分裝,用變性的重組人Cytochrome C作為抗原制備而成的抗Cytochrome C小鼠單克隆抗體?寺√枮7H8。
本Cytochrome C抗體識別的是總Cytochrome C (total Cytochrome C),可以檢測內(nèi)源性的Cytochrome C,未發(fā)現(xiàn)和其它激酶有交叉反應。
本抗體可以用于通過Western或免疫熒光檢測線粒體內(nèi)的Cytochrome C的釋放情況,以確定Cytochrome C釋放和凋亡的相關性,或直接用Cytochrome C釋放來判斷細胞凋亡的狀況。正常細胞Cytochrome C的染色集中在線粒體,而凋亡細胞的Cytochrome C則呈彌散分布。
Cytochrome C,即細胞色素C,是線粒體電子呼吸鏈中的一個重要蛋白。Cytochrome C在進化上高度保守。當細胞發(fā)生凋亡時,細胞色素C會從線粒體中釋放到細胞漿中,并且作為細胞凋亡的關鍵調控步驟。在細胞色素C和dATP存在的情況下,Caspase-9和Apaf-1可以相互結合,并促使Caspase-9激活。細胞色素C的釋放和Caspase-9的激活對于激活其它的Caspase包括Caspase-3,以及導致后續(xù)的DNA片段化(DNA fragmentation)至關重要。細胞凋亡的抑制蛋白,Bcl-2或Bcl-XL都可以抑制細胞色素C從線粒體的釋放;而細胞凋亡的促進蛋白Bax,可以誘導細胞色素C從線粒體的釋放。
Cytochrome C從線粒體釋放到細胞漿中常被作為細胞凋亡的一個重要指標。
配套提供了Western一抗稀釋液,可以用于Western檢測時的一抗稀釋。
建議抗體使用時的稀釋比例如下(實際使用時需根據(jù)抗原水平的高低作適當調整):
WB | IP | IF | F |
1:200 | 1:20 | 1:50 | 1:50 |
本抗體如果用于常規(guī)的Western檢測,至少可以檢測20次。
包裝清單:
產(chǎn)品編號 | 產(chǎn)品名稱 | 包裝 |
AC909-1 | Cytochrome C抗體(小鼠單抗) | 100μl |
AC909-2 | Western一抗稀釋液 | 20ml |
— | 說明書 | 1份 |
保存條件:
Cytochrome C抗體-20℃保存,Western一抗稀釋液-20℃或4℃保存,一年有效。Western一抗稀釋液優(yōu)先推薦4℃保存,長期不使用可以考慮-20℃保存,但凍融可能會導致出現(xiàn)輕微的渾濁和少量不溶物。
注意事項:
在Western實驗后,請注意回收稀釋的抗體。回收的抗體在進行Western實驗時至少可以重復使用10次。稀釋后的抗體,包括已經(jīng)使用過的稀釋抗體,4℃保存。
回收后重復使用的抗體,使用方法同新鮮稀釋的抗體。如果在重復使用過程中發(fā)現(xiàn)抗體出現(xiàn)輕微混濁現(xiàn)象,可以10000g離心1-3分鐘,取上清用于后續(xù)檢測。如果回收的抗體出現(xiàn)明顯的絮狀物或長霉長菌等情況,則可以考慮廢棄該抗體。
本產(chǎn)品僅限于專業(yè)人員的科學研究用,不得用于臨床診斷或治療,不得用于食品或藥品,不得存放于普通住宅內(nèi)。
為了您的安全和健康,請穿實驗服并戴一次性手套操作。
使用說明:
1. Western檢測:
A. 按照1:200用碧云天提供的Western一抗稀釋液稀釋抗體。
B. 把經(jīng)過封閉的蛋白膜與稀釋好的一抗4℃緩慢搖動過夜或室溫緩慢搖動2小時,確保稀釋的抗體至少能在搖動的瞬間覆蓋蛋白膜。
C. 回收稀釋的一抗,4℃保存以備下次繼續(xù)使用。
D. 按照Western的實驗步驟進行后續(xù)的洗滌、二抗孵育、洗滌和檢測等操作。
2. 免疫染色:
可以使用碧云天生產(chǎn)的免疫染色一抗稀釋液(P0103)稀釋抗體,使用后注意回收稀釋好的一抗,
3. 其它實驗操作請自行參考適當?shù)膒rotocol進行。