| 來源 | 用途 | 交叉反應(yīng)性 | 抗體類型 | HDAC4分子量 |
| Mouse | WB, IP, IC, E | H, M, R | IgG2a | ～140kD |
WB, Western blot; IP, Immunoprecipitation; IC, Immunocytochemistry; E, ELISA.
H, human; M, mouse; R, rat.
本HDAC4抗體(HDAC4 antibody，即Histone Deacetylase 4 antibody)為進(jìn)口分裝，用經(jīng)過適當(dāng)修飾的人工合成的人
HDAC4氨基端一段多肽(aa 1-19)作為抗原制備而成的抗HDAC4小鼠單克隆抗體。克隆號為HDAC4-144。
本HDAC4抗體識別的是總HDAC4(total HDAC4)，可以檢測內(nèi)源性的HDAC4，未發(fā)現(xiàn)和其它HDAC蛋白有交叉反應(yīng)。
染色質(zhì)由重復(fù)的核小體(necliosome)構(gòu)成，而核小體則包含了由Histone H2A，H2B，H3和H4各兩個(gè)分子組成的八聚體和與該八聚體結(jié)合的DNA。組蛋白(histone)上的一些Lys位點(diǎn)，可以被乙酰化修飾，從而影響染色質(zhì)的空間結(jié)構(gòu)，最終影響該區(qū)域的基因轉(zhuǎn)錄調(diào)控。通常當(dāng)組蛋白被乙�；瘯r(shí)，染色質(zhì)處于相對松散的構(gòu)象，此時(shí)轉(zhuǎn)錄因子可以結(jié)合到該區(qū)域促進(jìn)相關(guān)基因的轉(zhuǎn)錄。反之，當(dāng)組蛋白被去乙�；瘯r(shí)，染色質(zhì)結(jié)構(gòu)會變得相對致密，該區(qū)域相關(guān)基因的轉(zhuǎn)錄就會被抑制。組蛋白可以被多種乙�；敢阴；≒CAF，p300/CBP，GCN5，SRC-1，TAFII250，BRCA-2和Patt1等。組蛋白去乙�；赴℉DAC(histone deacetylase)家族和Sirtuin家族(Sirt家族)。HDAC家族包括HDAC1，HDAC2，HDAC3，HDAC4，HDAC5，HDAC6，HDAC7，HDAC8，HDAC9，HDAC10和HDAC11。通常HDAC可以去乙�；旧|(zhì)中某些特定區(qū)域的組蛋白，導(dǎo)致該區(qū)域的染色質(zhì)結(jié)構(gòu)變得相對緊密，從而抑制該區(qū)域相關(guān)基因的表達(dá)。Class I HDAC包括HDAC1，2，3，8；Class II HDAC包括HDAC4，5，6，7，9，10。Sirtuin家族被稱為Class III HDAC。Class IV HDAC只包括HDAC11。HDAC1，2，8主要定位在細(xì)胞核；而HDAC3則在細(xì)胞核和細(xì)胞漿都有分布，并且分布在膜結(jié)構(gòu)上。Class II HDAC在特定條件下可以在細(xì)胞核和細(xì)胞漿之間穿梭(shuttle in and out)。HDAC在命名時(shí)被稱為組蛋白去乙�；�，但事實(shí)上它們可以去乙�；喾N多樣的蛋白。例如，HDAC6可以和微管(microtuble)結(jié)合，可以去乙�；痶ubulin，Hsp90和cortactin等。目前發(fā)現(xiàn)大量的蛋白可以被乙酰化修飾，因此HDAC等乙�；揎椕副徽J(rèn)為在基因轉(zhuǎn)錄調(diào)控、信號轉(zhuǎn)導(dǎo)、生長發(fā)育、分化凋亡、代謝性疾病和腫瘤等多種生理病理過程中發(fā)揮重要作用。HDAC的抑制劑目前被認(rèn)為是很有前景的腫瘤治療藥物。
HDAC4有其自身的核定位信號(nuclear localization signal,NLS)和出核信號(nuclear export signal,NES)。HDAC4可以和14-3-3或MEF2相互作用，從而定位到細(xì)胞核中發(fā)揮作用。HDAC4在TGF信號通路中也有一定作用。HDAC4可以調(diào)控骨骼和肌肉的發(fā)育。另外，維持適當(dāng)?shù)腍DAC4蛋白水平和保持良好的視力有密切關(guān)系。
配套提供了Western一抗稀釋液，可以用于Western檢測時(shí)的一抗稀釋。
建議抗體使用時(shí)的稀釋比例如下(實(shí)際使用時(shí)需根據(jù)抗原水平的高低作適當(dāng)調(diào)整)：
| WB | IP | IC | E |
| 1:1000 | 1:100 | 1:200 | 1:5000 |
本抗體如果用于常規(guī)的Western檢測，至少可以檢測20次。
包裝清單：
| 產(chǎn)品編號 | 產(chǎn)品名稱 | 包裝 |
| AH388-1 | HDAC4抗體(小鼠單抗) | 20μl |
| AH388-2 | Western一抗稀釋液 | 20ml |
| — | 說明書 | 1份 |
保存條件：
HDAC4抗體-20℃保存，Western一抗稀釋液-20℃或4℃保存，一年有效。Western一抗稀釋液優(yōu)先推薦4℃保存，長期不使用可以考慮-20℃保存，但凍融可能會導(dǎo)致出現(xiàn)輕微的渾濁和少量不溶物。
注意事項(xiàng)：
在Western實(shí)驗(yàn)后，請注意回收稀釋的抗體。回收的抗體在進(jìn)行Western實(shí)驗(yàn)時(shí)至少可以重復(fù)使用10次。稀釋后的抗體，包括已經(jīng)使用過的稀釋抗體，4℃保存。
回收后重復(fù)使用的抗體，使用方法同新鮮稀釋的抗體。如果在重復(fù)使用過程中發(fā)現(xiàn)抗體出現(xiàn)輕微混濁現(xiàn)象，可以10000g離心1-3分鐘，取上清用于后續(xù)檢測。如果回收的抗體出現(xiàn)明顯的絮狀物或長霉長菌等情況，則可以考慮廢棄該抗體。
本產(chǎn)品僅限于專業(yè)人員的科學(xué)研究用，不得用于臨床診斷或治療，不得用于食品或藥品，不得存放于普通住宅內(nèi)。
為了您的安全和健康，請穿實(shí)驗(yàn)服并戴一次性手套操作。
使用說明：
1. Western檢測：
A. 按照1:1000用提供的Western一抗稀釋液稀釋抗體。
B. 把經(jīng)過封閉的蛋白膜與稀釋好的一抗4℃緩慢搖動(dòng)過夜或室溫緩慢搖動(dòng)2小時(shí)，確保稀釋的抗體至少能在搖動(dòng)的瞬間覆蓋蛋白膜。
C. 回收稀釋的一抗，4℃保存以備下次繼續(xù)使用。
D. 按照Western的實(shí)驗(yàn)步驟進(jìn)行后續(xù)的洗滌、二抗孵育、洗滌和檢測等操作。具
2. 免疫染色：
可以使用生產(chǎn)的免疫染色一抗稀釋液(P0103)稀釋抗體，使用后注意回收稀釋好的一抗，
3. 其它實(shí)驗(yàn)操作請自行參考適當(dāng)?shù)膒rotocol進(jìn)行。
