來源 | 用途 | 交叉反應(yīng)性 | 抗體識別位點(diǎn) | mTOR分子量 |
Mouse | WB, ICC, FC | H, M | - | ~289kD |
WB,Western blot;IP,Immunoprecipitation;IF,Immunofluorescence;IHC,Immunohistochemistry;
ICC,Immunocytochemistry;FC,Flow Cytometry;ELISA,Enzyme-linked Immunosorbent Assay;
ChIP,Chromatin Immunoprecipitation Assay.H,Human;M,Mouse;R,Rat;C,Chicken;Cw,Cow;
Dg,Dog;Gp,Guinea pig;Hm,Hamster;Hr,Horse;Mk,Monkey;Pg,Pig;Rb,Rabbit;S,Sheep;
Z,Zebrafish;All,all species expected.
本mTOR抗體(mTOR antibody,Mammalian Target of Rapamycin antibody)為進(jìn)口分裝,用重組表達(dá)純化的人mTOR作為抗原制備而成的抗mTOR小鼠單克隆抗體。
本mTOR抗體識別的是總mTOR(total mTOR),可以檢測內(nèi)源性的mTOR。
mTOR(mammalian target of rapamycin),也稱FRAP或RAFT,是一種絲氨酸/蘇氨酸蛋白激酶,是一種能量、營養(yǎng)和氧化還原水平的感知蛋白,可以調(diào)控和平衡營養(yǎng)狀態(tài)和細(xì)胞生長。mTOR可以整合多種上游信號,包括胰島素,IGF-1和IGF-2等生長因子,有絲分裂原(mitogen)等信號。當(dāng)營養(yǎng)充足時,mTOR可以響應(yīng)phosphatidic acid介導(dǎo)的信號,激活p70 S6 kinase,抑制eIF4E抑制因子4E-BP1,隨后導(dǎo)致一系列特定mRNA的翻譯。mTOR的Ser2448可以被PI3 kinase/Akt信號通路所激活,并可以在Ser2481發(fā)生自身磷酸化。mTOR在細(xì)胞生長過程起重要調(diào)控作用,一些腫瘤細(xì)胞中經(jīng)常會出現(xiàn)mTOR調(diào)控的異常,因此mTOR也被當(dāng)做是腫瘤治療的藥靶。近期研究表面抑制mTOR可以在酵母、線蟲和果蠅中延長壽命,并且mTOR的抑制劑rapamycin喂食小鼠發(fā)現(xiàn)可以顯著延長壽命。另外,有研究提示能量攝入限制(caloric restriction)和methionine限制誘導(dǎo)的長壽也是通過下調(diào)mTRO活性實(shí)現(xiàn)的。
配套提供了Western一抗稀釋液,可以用于Western檢測時的一抗稀釋。
建議抗體使用時的稀釋比例如下(實(shí)際使用時需根據(jù)抗原水平的高低作適當(dāng)調(diào)整):
WB | ICC | FC |
1:1000 | 1:200 | 1:100 |
本抗體如果用于常規(guī)的Western檢測,可以檢測至少20次。
包裝清單:
產(chǎn)品編號 | 產(chǎn)品名稱 | 包裝 |
AM832-1 | mTOR抗體(小鼠單抗) | 20μl |
AM832-2 | Western一抗稀釋液 | 20ml |
— | 說明書 | 1份 |
保存條件:
mTOR抗體-20℃保存,Western一抗稀釋液-20℃或4℃保存,一年有效。Western一抗稀釋液優(yōu)先推薦4℃保存,長期不使用可以考慮-20℃保存,但凍融可能會導(dǎo)致出現(xiàn)輕微的渾濁和少量不溶物。
注意事項(xiàng):
在Western實(shí)驗(yàn)后,請注意回收稀釋的抗體。回收的抗體在進(jìn)行Western實(shí)驗(yàn)時至少可以重復(fù)使用10次。稀釋后的抗體,包括已經(jīng)使用過的稀釋抗體,4℃保存。
回收后重復(fù)使用的抗體,使用方法同新鮮稀釋的抗體。如果在重復(fù)使用過程中發(fā)現(xiàn)抗體出現(xiàn)輕微混濁現(xiàn)象,可以10000g離心1-3分鐘,取上清用于后續(xù)檢測。如果回收的抗體出現(xiàn)明顯的絮狀物或長霉長菌等情況,則可以考慮廢棄該抗體。
本產(chǎn)品僅限于專業(yè)人員的科學(xué)研究用,不得用于臨床診斷或治療,不得用于食品或藥品,不得存放于普通住宅內(nèi)。
為了您的安全和健康,請穿實(shí)驗(yàn)服并戴一次性手套操作。
使用說明:
1. Western檢測:
A. 按照1:1000用提供的Western一抗稀釋液稀釋抗體。
B. 把經(jīng)過封閉的蛋白膜與稀釋好的一抗4℃緩慢搖動過夜或室溫緩慢搖動2小時,確保稀釋的抗體至少能在搖動的瞬間覆蓋蛋白膜。
C. 回收稀釋的一抗,4℃保存以備下次繼續(xù)使用。
D. 按照Western的實(shí)驗(yàn)步驟進(jìn)行后續(xù)的洗滌、二抗孵育、洗滌和檢測等操作。具
2. 免疫染色:
可以使用生產(chǎn)的免疫染色一抗稀釋液(P0103)稀釋抗體,使用后注意回收稀釋好的一抗,
3. 其它實(shí)驗(yàn)操作請自行參考適當(dāng)?shù)膒rotocol進(jìn)行。