來源 | 用途 | 交叉反應(yīng)性 | 抗體類型 | HDAC3分子量 |
Mouse | WB, IP, IC | H, M, R, Bo, Ham | IgG2a | 49~53kD |
WB, Western blot; IP, Immunoprecipitation; IC, immunocytochemistry.
H, human; M, mouse; R, rat; Bo, bovine; Ham, Hamster.
本HDAC3抗體(HDAC3 antibody,即Histone Deacetylase 3 antibody為進口分裝,用經(jīng)過適當(dāng)修飾的人工合成的人
HDAC3一段多肽(aa 411-428)作為抗原制備而成的抗HDAC3小鼠單克隆抗體?寺√枮3G6。
染色質(zhì)由重復(fù)的核小體(necliosome)構(gòu)成,而核小體則包含了由Histone H2A,H2B,H3和H4各兩個分子組成的八聚體和與該八聚體結(jié)合的DNA。組蛋白(histone)上的一些Lys位點,可以被乙;揎棧瑥亩绊懭旧|(zhì)的空間結(jié)構(gòu),最終影響該區(qū)域的基因轉(zhuǎn)錄調(diào)控。通常當(dāng)組蛋白被乙;瘯r,染色質(zhì)處于相對松散的構(gòu)象,此時轉(zhuǎn)錄因子可以結(jié)合到該區(qū)域促進相關(guān)基因的轉(zhuǎn)錄。反之,當(dāng)組蛋白被去乙酰化時,染色質(zhì)結(jié)構(gòu)會變得相對致密,該區(qū)域相關(guān)基因的轉(zhuǎn)錄就會被抑制。組蛋白可以被多種乙酰化酶乙;,包括PCAF,p300/CBP,GCN5,SRC-1,TAFII250,BRCA-2和Patt1等。組蛋白去乙酰化酶包括HDAC(histone deacetylase)家族和Sirtuin家族(Sirt家族)。HDAC家族包括HDAC1,HDAC2,HDAC3,HDAC4,HDAC5,HDAC6,HDAC7,HDAC8,HDAC9,HDAC10和HDAC11。通常HDAC可以去乙酰化染色質(zhì)中某些特定區(qū)域的組蛋白,導(dǎo)致該區(qū)域的染色質(zhì)結(jié)構(gòu)變得相對緊密,從而抑制該區(qū)域相關(guān)基因的表達(dá)。Class I HDAC包括HDAC1,2,3,8;Class II HDAC包括HDAC4,5,6,7,9,10。Sirtuin家族被稱為Class III HDAC。Class IV HDAC只包括HDAC11。HDAC1,2,8主要定位在細(xì)胞核;而HDAC3則在細(xì)胞核和細(xì)胞漿都有分布,并且分布在膜結(jié)構(gòu)上。Class II HDAC在特定條件下可以在細(xì)胞核和細(xì)胞漿之間穿梭(shuttle in and out)。HDAC在命名時被稱為組蛋白去乙酰化酶,但事實上它們可以去乙;喾N多樣的蛋白。例如,HDAC6可以和微管(microtuble)結(jié)合,可以去乙;痶ubulin,Hsp90和cortactin等。目前發(fā)現(xiàn)大量的蛋白可以被乙;揎棧虼薍DAC等乙酰化修飾酶被認(rèn)為在基因轉(zhuǎn)錄調(diào)控、信號轉(zhuǎn)導(dǎo)、生長發(fā)育、分化凋亡、代謝性疾病和腫瘤等多種生理病理過程中發(fā)揮重要作用。HDAC的抑制劑目前被認(rèn)為是很有前景的腫瘤治療藥物。
HDAC3具有組蛋白去乙;富钚。同時HDAC3可通過與鋅指類轉(zhuǎn)錄因子YY1相結(jié)合而參與轉(zhuǎn)錄調(diào)節(jié)。HDAC3可下調(diào)p53功能,從而調(diào)整細(xì)胞生長和凋亡過程。HDAC3被認(rèn)為是一種抑癌基因。
配套提供了Western一抗稀釋液,可以用于Western檢測時的一抗稀釋。
建議抗體使用時的稀釋比例如下(實際使用時需根據(jù)抗原水平的高低作適當(dāng)調(diào)整):
WB | IP | IC |
1:1000 | 1:100 | 1:200 |
本抗體如果用于常規(guī)的Western檢測,至少可以檢測20次。
包裝清單:
產(chǎn)品編號 | 產(chǎn)品名稱 | 包裝 |
AH385-1 | HDAC3抗體(小鼠單抗) | 20μl |
AH385-2 | Western一抗稀釋液 | 20ml |
— | 說明書 | 1份 |
保存條件:
HDAC3抗體-20℃保存,Western一抗稀釋液-20℃或4℃保存,一年有效。Western一抗稀釋液優(yōu)先推薦4℃保存,長期不使用可以考慮-20℃保存,但凍融可能會導(dǎo)致出現(xiàn)輕微的渾濁和少量不溶物。
注意事項:
在Western實驗后,請注意回收稀釋的抗體;厥盏目贵w在進行Western實驗時至少可以重復(fù)使用10次。稀釋后的抗體,包括已經(jīng)使用過的稀釋抗體,4℃保存。
回收后重復(fù)使用的抗體,使用方法同新鮮稀釋的抗體。如果在重復(fù)使用過程中發(fā)現(xiàn)抗體出現(xiàn)輕微混濁現(xiàn)象,可以10000g離心1-3分鐘,取上清用于后續(xù)檢測。如果回收的抗體出現(xiàn)明顯的絮狀物或長霉長菌等情況,則可以考慮廢棄該抗體。
本產(chǎn)品僅限于專業(yè)人員的科學(xué)研究用,不得用于臨床診斷或治療,不得用于食品或藥品,不得存放于普通住宅內(nèi)。
為了您的安全和健康,請穿實驗服并戴一次性手套操作。
使用說明:
1. Western檢測:
A. 按照1:1000用提供的Western一抗稀釋液稀釋抗體。
B. 把經(jīng)過封閉的蛋白膜與稀釋好的一抗4℃緩慢搖動過夜或室溫緩慢搖動2小時,確保稀釋的抗體至少能在搖動的瞬間覆蓋蛋白膜。
C. 回收稀釋的一抗,4℃保存以備下次繼續(xù)使用。
D. 按照Western的實驗步驟進行后續(xù)的洗滌、二抗孵育、洗滌和檢測等操作。
2. 免疫染色:
可以使用生產(chǎn)的免疫染色一抗稀釋液(P0103)稀釋抗體,使用后注意回收稀釋好的一抗,
3. 其它實驗操作請自行參考適當(dāng)?shù)膒rotocol進行。