來源 | 用途 | 抗體識別位點(diǎn) | 抗體類型 |
Mouse | WB, IP, IF | Flag tag | IgG1 |
WB, Western blot; IP, Immunoprecipitation; IF, Immunofluorescence.
本Flag抗體(Flag antibody)為進(jìn)口分裝,用經(jīng)過適當(dāng)修飾的人工合成Flag tag多肽DYKDDDDK作為抗原,然后用protein G和抗原多肽親和柱經(jīng)過兩步純化得到的高純度單克隆抗體,克隆號為M2。
本Flag抗體廣泛地用于Flag tag(DYKDDDDK)融合表達(dá)蛋白的檢測。本抗體可以檢測位于融合蛋白N-terminal或C-terminal的Flag tag,也可以檢測位于融合蛋白內(nèi)部的Flag tag。
DNA重組技術(shù)使給目標(biāo)蛋白帶上特定tag成為可能,這些常用的tag包括myc、HA、Flag、His、GST等。帶上tag后,通常不會影響目標(biāo)蛋白的生物活性和細(xì)胞內(nèi)定位。但檢測和tag融合表達(dá)的目標(biāo)蛋白時(shí),使用商業(yè)化的相應(yīng)tag抗體就可以完成,大大方便了很多實(shí)驗(yàn)檢測。
本Flag抗體可用于檢測和Flag tag融合表達(dá)蛋白的表達(dá)、細(xì)胞內(nèi)定位,以及純化、定性或定量檢測Flag tag融合表達(dá)蛋白等。
配套提供了Western一抗稀釋液,可以用于Western檢測時(shí)的一抗稀釋。
建議抗體使用時(shí)的稀釋比例如下(實(shí)際使用時(shí)需根據(jù)抗原水平的高低作適當(dāng)調(diào)整):
WB | IP | IF |
1:1000 | 1:100 | 1:1000 |
本抗體如果用于常規(guī)的Western檢測,至少可以檢測40次。
包裝清單:
產(chǎn)品編號 | 產(chǎn)品名稱 | 包裝 |
AF519-1 | Flag抗體(小鼠單抗) | 40μl |
AF519-2 | Western一抗稀釋液 | 40ml |
— | 說明書 | 1份 |
保存條件:
Flag抗體-20℃保存,Western一抗稀釋液-20℃或4℃保存,一年有效。Western一抗稀釋液優(yōu)先推薦4℃保存,長期不使用可以考慮-20℃保存,但凍融可能會導(dǎo)致出現(xiàn)輕微的渾濁和少量不溶物。
注意事項(xiàng):
在Western實(shí)驗(yàn)后,請注意回收稀釋的抗體;厥盏目贵w在進(jìn)行Western實(shí)驗(yàn)時(shí)至少可以重復(fù)使用10次。稀釋后的抗體,包括已經(jīng)使用過的稀釋抗體,4℃保存。
回收后重復(fù)使用的抗體,使用方法同新鮮稀釋的抗體。如果在重復(fù)使用過程中發(fā)現(xiàn)抗體出現(xiàn)輕微混濁現(xiàn)象,可以10000g離心1-3分鐘,取上清用于后續(xù)檢測。如果回收的抗體出現(xiàn)明顯的絮狀物或長霉長菌等情況,則可以考慮廢棄該抗體。
本產(chǎn)品僅限于專業(yè)人員的科學(xué)研究用,不得用于臨床診斷或治療,不得用于食品或藥品,不得存放于普通住宅內(nèi)。
為了您的安全和健康,請穿實(shí)驗(yàn)服并戴一次性手套操作。
使用說明:
1. Western檢測:
A. 按照1:1000用提供的Western一抗稀釋液稀釋抗體。
B. 把經(jīng)過封閉的蛋白膜與稀釋好的一抗4℃緩慢搖動過夜或室溫緩慢搖動2小時(shí),確保稀釋的抗體至少能在搖動的瞬間覆蓋蛋白膜。
C. 回收稀釋的一抗,4℃保存以備下次繼續(xù)使用。
D. 按照Western的實(shí)驗(yàn)步驟進(jìn)行后續(xù)的洗滌、二抗孵育、洗滌和檢測等操作。
2. 免疫染色:
可以使用生產(chǎn)的免疫染色一抗稀釋液(P0103)稀釋抗體,使用后注意回收稀釋好的一抗,
3. 其它實(shí)驗(yàn)操作請自行參考適當(dāng)?shù)膒rotocol進(jìn)行。