來源 | 用途 | 交叉反應性 | 抗體類型 | Rab5分子量 |
Mouse | WB, IC, E | H, M, R, B, Ca | IgG3 | ~24kD |
WB, Western blot; IC, immunocytochemistry; E, ELISA.
H, human; M, mouse; R, rat; B, bovine; Ca, canine.
本Rab5抗體(Rab5 antibody)為進口分裝,用經(jīng)過適當修飾的人工合成的人Rab5的一段多肽(aa2-14)作為抗原制備而成的抗Rab5小鼠單克隆抗體。克隆號為Rab5-65。
本Rab5抗體識別的是總Rab5(total Rab5),可以檢測內(nèi)源性的Rab5。
Rab5是小Rab GTPases的Ras超家族成員。Rab5主要定位于早期內(nèi)體(early endosome),在細胞質(zhì)膜上也有分布,在內(nèi)吞作用早期的囊泡運輸過程中起關(guān)鍵調(diào)節(jié)作用。Rab5 GTP和Rab5 GDP之間的構(gòu)像改變是內(nèi)吞過程多個步驟的限速因素。Rab5與GDP結(jié)合處于非激活狀態(tài),與GTP結(jié)合處于激活狀態(tài)。這兩種狀態(tài)之間的轉(zhuǎn)換則由GEPs(GEP/GTP exchange factors)、GDIs(GDP-dissociationi inhibitors)和GAPs(GTPase-activating proteins)所調(diào)控。Rab通過與幾種Rab5特異性的效應蛋白相互作用而發(fā)揮其功能。這些效應蛋白在內(nèi)體(endosome)的特定Rab結(jié)構(gòu)域(Rab domain)和Rab5形成復合物,促進Rab5載運目標貨物(Rab5-cargo targets)在內(nèi)體和質(zhì)膜之間的循環(huán)利用。Rab5常被用作早期內(nèi)體的分子標記(early endosome marker)。
配套提供了Western一抗稀釋液,可以用于Western檢測時的一抗稀釋。
建議抗體使用時的稀釋比例如下(實際使用時需根據(jù)抗原水平的高低作適當調(diào)整):
WB | IC | E |
1:500 | 1:50 | 1:1000 |
本抗體如果用于常規(guī)的Western檢測,至少可以檢測20次。
包裝清單:
產(chǎn)品編號 | 產(chǎn)品名稱 | 包裝 |
AR038-1 | Rab5抗體(小鼠單抗) | 40μl |
AR038-2 | Western一抗稀釋液 | 20ml |
— | 說明書 | 1份 |
保存條件:
Rab5抗體-20℃保存,Western一抗稀釋液-20℃或4℃保存,一年有效。Western一抗稀釋液優(yōu)先推薦4℃保存,長期不使用可以考慮-20℃保存,但凍融可能會導致出現(xiàn)輕微的渾濁和少量不溶物。
注意事項:
在Western實驗后,請注意回收稀釋的抗體。回收的抗體在進行Western實驗時至少可以重復使用10次。稀釋后的抗體,包括已經(jīng)使用過的稀釋抗體,4℃保存。
回收后重復使用的抗體,使用方法同新鮮稀釋的抗體。如果在重復使用過程中發(fā)現(xiàn)抗體出現(xiàn)輕微混濁現(xiàn)象,可以10000g離心1-3分鐘,取上清用于后續(xù)檢測。如果回收的抗體出現(xiàn)明顯的絮狀物或長霉長菌等情況,則可以考慮廢棄該抗體。
本產(chǎn)品僅限于專業(yè)人員的科學研究用,不得用于臨床診斷或治療,不得用于食品或藥品,不得存放于普通住宅內(nèi)。
為了您的安全和健康,請穿實驗服并戴一次性手套操作。
使用說明:
1. Western檢測:
A. 按照1:1000用提供的Western一抗稀釋液稀釋抗體。
B. 把經(jīng)過封閉的蛋白膜與稀釋好的一抗4℃緩慢搖動過夜或室溫緩慢搖動2小時,確保稀釋的抗體至少能在搖動的瞬間覆蓋蛋白膜。
C. 回收稀釋的一抗,4℃保存以備下次繼續(xù)使用。
D. 按照Western的實驗步驟進行后續(xù)的洗滌、二抗孵育、洗滌和檢測等操作。
2. 免疫染色:
可以使用生產(chǎn)的免疫染色一抗稀釋液(P0103)稀釋抗體,使用后注意回收稀釋好的一抗,
3. 其它實驗操作請自行參考適當?shù)膒rotocol進行。