| 來(lái)源 | 用途 | 交叉反應(yīng)性 | 抗體類(lèi)型 | HDAC5分子量 |
| Mouse | WB, IP, IC, E | H, M, R | IgG1 | ～124kD |
WB, Western blot; IP, Immunoprecipitation; IC, Immunocytochemistry; E, ELISA.
H, human; M, mouse; R, rat.
本HDAC5抗體(HDAC5 antibody，即Histone Deacetylase 5 antibody為進(jìn)口分裝，用經(jīng)過(guò)適當(dāng)修飾的人工合成的HDAC5氨基端一段多肽(aa 4-19)作為抗原制備而成的抗HDAC5小鼠單克隆抗體�？寺√�(hào)為HDAC5-35。
本HDAC5抗體識(shí)別的是總HDAC5(total HDAC5)，可以檢測(cè)內(nèi)源性的HDAC5，未發(fā)現(xiàn)和其它HDAC蛋白有交叉反應(yīng)。
染色質(zhì)由重復(fù)的核小體(necliosome)構(gòu)成，而核小體則包含了由Histone H2A，H2B，H3和H4各兩個(gè)分子組成的八聚體和與該八聚體結(jié)合的DNA。組蛋白(histone)上的一些Lys位點(diǎn)，可以被乙�；揎�，從而影響染色質(zhì)的空間結(jié)構(gòu)，最終影響該區(qū)域的基因轉(zhuǎn)錄調(diào)控。通常當(dāng)組蛋白被乙酰化時(shí)，染色質(zhì)處于相對(duì)松散的構(gòu)象，此時(shí)轉(zhuǎn)錄因子可以結(jié)合到該區(qū)域促進(jìn)相關(guān)基因的轉(zhuǎn)錄。反之，當(dāng)組蛋白被去乙酰化時(shí)，染色質(zhì)結(jié)構(gòu)會(huì)變得相對(duì)致密，該區(qū)域相關(guān)基因的轉(zhuǎn)錄就會(huì)被抑制。組蛋白可以被多種乙�；敢阴；�，包括PCAF，p300/CBP，GCN5，SRC-1，TAFII250，BRCA-2和Patt1等。組蛋白去乙酰化酶包括HDAC(histone deacetylase)家族和Sirtuin家族(Sirt家族)。HDAC家族包括HDAC1，HDAC2，HDAC3，HDAC4，HDAC5，HDAC6，HDAC7，HDAC8，HDAC9，HDAC10和HDAC11。通常HDAC可以去乙�；旧|(zhì)中某些特定區(qū)域的組蛋白，導(dǎo)致該區(qū)域的染色質(zhì)結(jié)構(gòu)變得相對(duì)緊密，從而抑制該區(qū)域相關(guān)基因的表達(dá)。Class I HDAC包括HDAC1，2，3，8；Class II HDAC包括HDAC4，5，6，7，9，10。Sirtuin家族被稱(chēng)為Class III HDAC。Class IV HDAC只包括HDAC11。HDAC1，2，8主要定位在細(xì)胞核；而HDAC3則在細(xì)胞核和細(xì)胞漿都有分布，并且分布在膜結(jié)構(gòu)上。Class II HDAC在特定條件下可以在細(xì)胞核和細(xì)胞漿之間穿梭(shuttle in and out)。HDAC在命名時(shí)被稱(chēng)為組蛋白去乙�；�，但事實(shí)上它們可以去乙酰化多種多樣的蛋白。例如，HDAC6可以和微管(microtuble)結(jié)合，可以去乙�；痶ubulin，Hsp90和cortactin等。目前發(fā)現(xiàn)大量的蛋白可以被乙�；揎棧虼薍DAC等乙�；揎椕副徽J(rèn)為在基因轉(zhuǎn)錄調(diào)控、信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)、生長(zhǎng)發(fā)育、分化凋亡、代謝性疾病和腫瘤等多種生理病理過(guò)程中發(fā)揮重要作用。HDAC的抑制劑目前被認(rèn)為是很有前景的腫瘤治療藥物。
HDAC5具有組蛋白去乙�；富钚裕梢院虷DAC3一起被免疫共沉淀。HDAC5在肌細(xì)胞分化過(guò)程中起重要作用。HDAC5可結(jié)合肌細(xì)胞增強(qiáng)因子(myocyte enhancer factor-2，MEF2)蛋白的氨基末端結(jié)構(gòu)域，抑制MEF2下游基因的表達(dá)。在多種癌細(xì)胞中過(guò)表達(dá)HDAC5，會(huì)導(dǎo)致非P53依賴(lài)的生長(zhǎng)抑制和細(xì)胞凋亡。
配套提供了Western一抗稀釋液，可以用于Western檢測(cè)時(shí)的一抗稀釋。
建議抗體使用時(shí)的稀釋比例如下(實(shí)際使用時(shí)需根據(jù)抗原水平的高低作適當(dāng)調(diào)整)：
| WB | IP | IC | E |
| 1:1000 | 1:100 | 1:200 | 1:5000 |
本抗體如果用于常規(guī)的Western檢測(cè)，至少可以檢測(cè)20次。
包裝清單：
| 產(chǎn)品編號(hào) | 產(chǎn)品名稱(chēng) | 包裝 |
| AH392-1 | HDAC5抗體(小鼠單抗) | 20μl |
| AH392-2 | Western一抗稀釋液 | 20ml |
| — | 說(shuō)明書(shū) | 1份 |
保存條件：
HDAC5抗體-20℃保存，Western一抗稀釋液-20℃或4℃保存，一年有效。Western一抗稀釋液優(yōu)先推薦4℃保存，長(zhǎng)期不使用可以考慮-20℃保存，但凍融可能會(huì)導(dǎo)致出現(xiàn)輕微的渾濁和少量不溶物。
注意事項(xiàng)：
在Western實(shí)驗(yàn)后，請(qǐng)注意回收稀釋的抗體。回收的抗體在進(jìn)行Western實(shí)驗(yàn)時(shí)至少可以重復(fù)使用10次。稀釋后的抗體，包括已經(jīng)使用過(guò)的稀釋抗體，4℃保存。
回收后重復(fù)使用的抗體，使用方法同新鮮稀釋的抗體。如果在重復(fù)使用過(guò)程中發(fā)現(xiàn)抗體出現(xiàn)輕微混濁現(xiàn)象，可以10000g離心1-3分鐘，取上清用于后續(xù)檢測(cè)。如果回收的抗體出現(xiàn)明顯的絮狀物或長(zhǎng)霉長(zhǎng)菌等情況，則可以考慮廢棄該抗體。
本產(chǎn)品僅限于專(zhuān)業(yè)人員的科學(xué)研究用，不得用于臨床診斷或治療，不得用于食品或藥品，不得存放于普通住宅內(nèi)。
為了您的安全和健康，請(qǐng)穿實(shí)驗(yàn)服并戴一次性手套操作。
1. Western檢測(cè)：
A. 按照1:1000用提供的Western一抗稀釋液稀釋抗體。
B. 把經(jīng)過(guò)封閉的蛋白膜與稀釋好的一抗4℃緩慢搖動(dòng)過(guò)夜或室溫緩慢搖動(dòng)2小時(shí)，確保稀釋的抗體至少能在搖動(dòng)的瞬間覆蓋蛋白膜。
C. 回收稀釋的一抗，4℃保存以備下次繼續(xù)使用。
D. 按照Western的實(shí)驗(yàn)步驟進(jìn)行后續(xù)的洗滌、二抗孵育、洗滌和檢測(cè)等操作。
2. 免疫染色：
可以使用生產(chǎn)的免疫染色一抗稀釋液(P0103)稀釋抗體，使用后注意回收稀釋好的一抗，
3. 其它實(shí)驗(yàn)操作請(qǐng)自行參考適當(dāng)?shù)膒rotocol進(jìn)行。
