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SDS-PAGE凝膠配制試劑盒

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 SDS-PAGE凝膠配制試劑盒提供了配制SDS-PAGE凝膠所需的各種試劑,用戶只需自備制膠器具和蒸餾水,即可配制PAGE膠(即聚丙烯酰胺凝膠)。

SDS-PAGE凝膠配制試劑盒不僅可用于配制SDS-PAGE凝膠,也可用于配制非變性(native)PAGE凝膠。
本試劑盒約可配制30-50塊常規(guī)大小的PAGE膠。
包裝清單:

產(chǎn)品編號 產(chǎn)品名稱 包裝
P0012A-1 30% Acr-Bis (29:1) 100ml
P0012A-2 1M Tris-HCl, pH8.8 100ml
P0012A-3 10% SDS 5ml
P0012A-4 凝膠聚合催化劑 0.5g
P0012A-5 TEMED 0.5ml
P0012A-6 1M Tris-HCl, pH6.8 15ml
說明書 1份

保存條件:
1M Tris-HCl,pH8.8、10% SDS、凝膠聚合催化劑和1M Tris-HCl,pH6.8室溫保存。30% Acr-Bis(29:1)和TEMED 4℃避光保存。凝膠聚合催化劑加水配制成10%溶液后,分裝成小管-20℃保存,通常半年內(nèi)有效。
注意事項(xiàng):
凝膠聚合催化劑配制成10%溶液后,應(yīng)當(dāng)-20℃保存。同時(shí)應(yīng)盡量減少室溫存放時(shí)間,以防失效。
TEMED易揮發(fā),使用后請蓋緊瓶蓋。另外凝膠凝聚的速度和溫度及光照關(guān)系密切,可通過適當(dāng)調(diào)節(jié)TEMED的用量,控制在不同的室內(nèi)環(huán)境下凝膠凝聚的速度。
TEMED易燃,有腐蝕性,操作時(shí)請小心,并注意有效防護(hù)以避免直接接觸人體或腐蝕其他物品。
本產(chǎn)品僅限于專業(yè)人員的科學(xué)研究用,不得用于臨床診斷或治療,不得用于食品或藥品,不得存放于普通住宅內(nèi)。
為了您的安全和健康,請穿實(shí)驗(yàn)服并戴一次性手套操作。

使用說明:
1. 10%凝膠聚合催化劑的配制:例如稱取0.1g凝膠聚合催化劑,用水溶解,并定容至1ml,即為10%凝膠聚合催化劑。
2. 根據(jù)目的蛋白的分子量大小選擇合適的凝膠濃度,再按照下面的表格配制SDS-PAGE的分離膠(即下層膠):
不同濃度的SDS-PAGE分離膠的最佳分離范圍:

SDS-PAGE分離膠濃度 最佳分離范圍
6%膠 50-150kD
8%膠 30-90kD
10%膠 20-80kD
12%膠 12-60kD
15%膠 10-40kD

 

成分 配制不同體積SDS-PAGE分離膠所需各成分的體積(毫升)
6%膠 5 10 15 20 30 50
蒸餾水 2.0 4.0 6.0 8.0 12.0 20.0
30%Acr-Bis(29:1) 1.0 2.0 3.0 4.0 6.0 10.0
1M Tris, pH8.8 1.9 3.8 5.7 7.6 11.4 19.0
10%SDS 0.05 0.1 0.15 0.2 0.3 0.5
10%凝膠聚合催化劑 0.05 0.1 0.15 0.2 0.3 0.5
TEMED 0.004 0.008 0.012 0.016 0.024 0.04
成分 配制不同體積SDS-PAGE分離膠所需各成分的體積(毫升)
8%膠 5 10 15 20 30 50
蒸餾水 1.7 3.3 5 6.7 10.0 16.7
30%Acr-Bis(29:1) 1.3 2.7 4.0 5.3 8.0 13.3
1M Tris, pH8.8 1.9 3.8 5.7 7.6 11.4 19.0
10%SDS 0.05 0.1 0.15 0.2 0.3 0.5
10%凝膠聚合催化劑 0.05 0.1 0.15 0.2 0.3 0.5
TEMED 0.003 0.006 0.009 0.012 0.018 0.03
成分 配制不同體積SDS-PAGE分離膠所需各成分的體積(毫升)
10%膠 5 10 15 20 30 50
蒸餾水 1.3 2.7 4.0 5.3 8.0 13.3
30%Acr-Bis(29:1) 1.7 3.3 5.0 6.7 10.0 16.7
1M Tris, pH8.8 1.9 3.8 5.7 7.6 11.4 19.0
10%SDS 0.05 0.1 0.15 0.2 0.3 0.5
10%凝膠聚合催化劑 0.05 0.1 0.15 0.2 0.3 0.5
TEMED 0.002 0.004 0.006 0.008 0.012 0.02
成分 配制不同體積SDS-PAGE分離膠所需各成分的體積(毫升)
12%膠 5 10 15 20 30 50
蒸餾水 1.0 2.0 3.0 4.0 6.0 10.0
30%Acr-Bis(29:1) 2.0 4.0 6.0 8.0 12.0 20.0
1M Tris, pH8.8 1.9 3.8 5.7 7.6 11.4 19.0
10%SDS 0.05 0.1 0.15 0.2 0.3 0.5
10%凝膠聚合催化劑 0.05 0.1 0.15 0.2 0.3 0.5
TEMED 0.002 0.004 0.006 0.008 0.012 0.02
成分 配制不同體積SDS-PAGE分離膠所需各成分的體積(毫升)
15%膠 5 10 15 20 30 50
蒸餾水 0.5 1.0 1.5 2.0 3.0 5.0
30%Acr-Bis(29:1) 2.5 5.0 7.5 10.0 15.0 25.0
1M Tris, pH8.8 1.9 3.8 5.7 7.6 11.4 19.0
10%SDS 0.05 0.1 0.15 0.2 0.3 0.5
10%凝膠聚合催化劑 0.05 0.1 0.15 0.2 0.3 0.5
TEMED 0.002 0.004 0.006 0.008 0.012 0.02

注:如果配制非變性膠,參考上述配方,不加10%SDS即可配制成非變性PAGE膠。
2. 按照如下表格配制SDS-PAGE的濃縮膠(也稱堆積膠、積層膠或上層膠):

成分 配制不同體積SDS-PAGE濃縮膠所需各成分的體積(毫升)
5%膠 2 3 4 6 8 10
蒸餾水 1.4 2.1 2.7 4.1 5.5 6.8
30%Acr-Bis(29:1) 0.33 0.5 0.67 1.0 1.3 1.7
1M Tris, pH6.8 0.25 0.38 0.5 0.75 1.0 1.25
10%SDS 0.02 0.03 0.04 0.06 0.08 0.1
10%凝膠聚合催化劑 0.02 0.03 0.04 0.06 0.08 0.1
TEMED 0.002 0.003 0.004 0.006 0.008 0.01

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