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SDS-PAGE凝膠快速配制試劑盒

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 SDS-PAGE凝膠快速配制試劑盒(SDS-PAGE Gel Quick Preparation Kit)提供了配制SDS-PAGE凝膠所需的各種試劑,用戶只需自備制膠器具和蒸餾水,即可配制SDS-PAGE膠(即SDS聚丙烯酰胺凝膠)。

本試劑盒中把凝膠配制所需的緩沖試劑、SDS等預(yù)混合成下層膠緩沖液(4X)和上層膠緩沖液(4X),簡(jiǎn)化了凝膠配制的步驟。下層膠緩沖液中含Tris pH8.8及適量SDS,上層膠緩沖液中含Tris pH6.8及適量SDS。
本試劑盒約可配制30-50塊常規(guī)大小的PAGE膠。
包裝清單:

產(chǎn)品編號(hào) 產(chǎn)品名稱 包裝
P0012AC-1 30% Acr-Bis (29:1) 100ml
P0012AC-2 下層膠緩沖液(4X) 70ml
P0012AC-3 上層膠緩沖液(4X) 30ml
P0012AC-4 凝膠聚合催化劑 0.5g
P0012AC-5 TEMED 0.5ml
說(shuō)明書(shū) 1份

保存條件:
下層膠緩沖液(4X)、上層膠緩沖液(4X)和凝膠聚合催化劑室溫保存。30% Acr-Bis (29:1)和TEMED 4℃避光保存。凝膠聚合催化劑用水配制成10%溶液后,分裝成小管-20℃保存,通常半年內(nèi)有效。
注意事項(xiàng):
凝膠聚合催化劑配制成10%溶液后,應(yīng)當(dāng)-20℃保存。同時(shí)應(yīng)盡量減少室溫存放時(shí)間,以防失效。
TEMED易揮發(fā),使用后請(qǐng)蓋緊瓶蓋。另外凝膠凝聚的速度和溫度及光照關(guān)系密切,可通過(guò)適當(dāng)調(diào)節(jié)TEMED的用量,控制在不同的室內(nèi)環(huán)境下凝膠凝聚的速度。
溫度較低時(shí),下層膠緩沖液(4X)和上層膠緩沖液(4X)中的SDS可能析出。此時(shí)需水浴溫育,并在完全溶解和混勻后使用。
TEMED易燃,有腐蝕性,操作時(shí)請(qǐng)小心,并注意有效防護(hù)以避免直接接觸人體或腐蝕其他物品。
本產(chǎn)品僅限于專業(yè)人員的科學(xué)研究用,不得用于臨床診斷或治療,不得用于食品或藥品,不得存放于普通住宅內(nèi)。
為了您的安全和健康,請(qǐng)穿實(shí)驗(yàn)服并戴一次性手套操作。

 

使用說(shuō)明:
1. 根據(jù)目的蛋白的分子量大小選擇合適的凝膠濃度,再按照下面的表格配制SDS-PAGE的分離膠(即下層膠):
不同濃度的SDS-PAGE分離膠的最佳分離范圍:

SDS-PAGE分離膠濃度 最佳分離范圍
6%膠 50-150kD
8%膠 30-90kD
10%膠 20-80kD
12%膠 12-60kD
15%膠 10-40kD

 

成分 配制不同體積SDS-PAGE分離膠所需各成分的體積(毫升)
6%膠 5 10 15 20 30 50
蒸餾水 2.7 5.4 8.1 10.8 16.2 27
30%Acr-Bis(29:1) 1.0 2.0 3.0 4.0 6.0 10.0
下層膠緩沖液(4X) 1.25 2.5 3.75 5.0 7.5 12.5
10%凝膠聚合催化劑 0.05 0.1 0.15 0.2 0.3 0.5
TEMED 0.004 0.008 0.012 0.016 0.024 0.04
成分 配制不同體積SDS-PAGE分離膠所需各成分的體積(毫升)
8%膠 5 10 15 20 30 50
蒸餾水 2.4 4.7 7.1 9.5 14.2 23.7
30%Acr-Bis(29:1) 1.3 2.7 4.0 5.3 8.0 13.3
下層膠緩沖液(4X) 1.25 2.5 3.75 5.0 7.5 12.5
10%凝膠聚合催化劑 0.05 0.1 0.15 0.2 0.3 0.5
TEMED 0.003 0.006 0.009 0.012 0.018 0.03
成分 配制不同體積SDS-PAGE分離膠所需各成分的體積(毫升)
10%膠 5 10 15 20 30 50
蒸餾水 2.0 4.1 6.1 8.1 12.2 20.3
30%Acr-Bis(29:1) 1.7 3.3 5.0 6.7 10.0 16.7
下層膠緩沖液(4X) 1.25 2.5 3.75 5.0 7.5 12.5
10%凝膠聚合催化劑 0.05 0.1 0.15 0.2 0.3 0.5
TEMED 0.002 0.004 0.006 0.008 0.012 0.02
成分 配制不同體積SDS-PAGE分離膠所需各成分的體積(毫升)
12%膠 5 10 15 20 30 50
蒸餾水 1.7 3.4 5.1 6.8 10.2 17.0
30%Acr-Bis(29:1) 2.0 4.0 6.0 8.0 12.0 20.0
下層膠緩沖液(4X) 1.25 2.5 3.75 5.0 7.5 12.5
10%凝膠聚合催化劑 0.05 0.1 0.15 0.2 0.3 0.5
TEMED 0.002 0.004 0.006 0.008 0.012 0.02
成分 配制不同體積SDS-PAGE分離膠所需各成分的體積(毫升)
15%膠 5 10 15 20 30 50
蒸餾水 1.2 2.4 3.6 4.8 7.2 12.0
30%Acr-Bis(29:1) 2.5 5.0 7.5 10.0 15.0 25.0
下層膠緩沖液(4X) 1.25 2.5 3.75 5.0 7.5 12.5
10%凝膠聚合催化劑 0.05 0.1 0.15 0.2 0.3 0.5
TEMED 0.002 0.004 0.006 0.008 0.012 0.02

2. 按照如下表格配制SDS-PAGE的濃縮膠(也稱堆積膠、積層膠或上層膠):

成分 配制不同體積SDS-PAGE濃縮膠所需各成分的體積(毫升)
5%膠 2 3 4 6 8 10
蒸餾水 1.17 1.75 2.33 3.5 4.7 5.8
30%Acr-Bis(29:1) 0.33 0.5 0.67 1.0 1.3 1.7
上層膠緩沖液(4X) 0.5 0.75 1 1.5 2 2.5
10%凝膠聚合催化劑 0.02 0.03 0.04 0.06 0.08 0.1
TEMED 0.002 0.003 0.004 0.006 0.008 0.01

 

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