本產(chǎn)品是專門用于從昆蟲、節(jié)肢動物、蛔蟲、扁形蟲和一些富含多糖的動物組織中提取基因組DNA的試劑盒。其原理是基于去垢劑在適當(dāng)?shù)碾x子強(qiáng)度條件下,特異地跟基因組DNA結(jié)合形成沉淀,然后在用硅膠膜離心吸附法進(jìn)行進(jìn)一步純化得到DNA。本產(chǎn)品具有下列特點:
1. 適用于用常規(guī)方法難以提取的、各種富含多糖的動物,包括昆蟲、節(jié)肢動物、蛔蟲、扁形蟲等。
2. 除新鮮樣品外,還適合于各種保存狀態(tài)的樣品,包括冷凍的樣品、用乙醇保存的樣品和福爾馬林保存的樣品。
3. 提取到的基因組DNA完整性,長度一般在20-50 Kb。
4. DNA純凈,OD260/280一般都在1.8左右,可直接用于PCR、酶切、雜 交等。
5. 操作簡單,整個過程約30分鐘。
安全無毒,本試劑盒對人體無毒,無腐蝕性和刺激性氣味
將相當(dāng)于0.1-0.3 g昆蟲液氮中研磨,轉(zhuǎn)移到1.5 mL塑料離心管中,加入1 mL溶液A,吹打混勻,65℃保溫5分鐘后離心1分鐘,轉(zhuǎn)移上清到一新離心管中,加入等體積溶液B,混勻,冰浴5分鐘,離心1分鐘,轉(zhuǎn)移上清到一新離心管中,用氯仿抽提一次,加入1.5倍體積的溶液C,混勻后轉(zhuǎn)移到離心吸附柱中,室溫放置5分鐘后離心半分鐘,用通用洗柱液洗兩次,空甩半分鐘,將離心吸附柱轉(zhuǎn)移到新的離心管中,加0.1 mL DNA洗脫液,室溫離心1分鐘即得DNA
:用本產(chǎn)品提取的棉鈴蟲的總DNA。最后用0.1 mL DNA洗脫液洗脫DNA,取10 μL在0.8%瓊脂糖凝膠中(緩沖液為1×SuperBuffer-2)300 V電泳10 min。