本產(chǎn)品用于快速提取革氏陰性細菌和革氏陽性細菌的基因組DNA。
1. DNA純凈,OD260/280一般都在1.9左右,直接用于PCR、酶切、雜交等。DNA產(chǎn)量在20 μg/mL左右。
2. 操作簡單,整個過程約15分鐘。細菌處理量在0.1-1.5 mL之間。
3. 價廉物美,與國外同類產(chǎn)品相比質(zhì)量相當(dāng),但價格便宜。
安全無毒,本試劑盒對人體無害,無腐蝕性和刺激性氣味。
將1.5 mL過夜培養(yǎng)的細菌轉(zhuǎn)移到塑料離心管中,離心3分鐘,加入0.6 mL溶液A 及15 μL RNase溶液,混勻后65℃保溫5分鐘,離心1分鐘,轉(zhuǎn)移上清到新的離心管中并棄掉上清,加入等體積溶液B,混勻,冰浴2分鐘,離心1分鐘,轉(zhuǎn)移上清到新的離心管中并加入等體積的氯仿,振蕩混勻后離心3分鐘,轉(zhuǎn)移上清到新的離心管中并用等體積異丙醇,振蕩混勻后離心5分鐘得DNA沉淀,用1 mL 75%乙醇清洗2次后得DNA沉淀(G+細菌還有溶菌酶處理步驟,此處略)。
用本產(chǎn)品提取1 mL過夜培養(yǎng)的B. subtilis (上圖)和E.coli DNA (左圖),各取1/10上樣電泳。M和λ均表示全長λDNA,其余均為細菌DNA。