本產(chǎn)品是在在天凈沙細菌DNAOUT基礎(chǔ)上開發(fā)的柱式升級產(chǎn)品,可以用于絕大多數(shù)革氏陽性和陰性細菌基因組DNA的快速提取。
1. 操作簡單,整個過程需要20分鐘左右(對一個樣品而言)。
2. 產(chǎn)率一般在5-30 μg/mL過液培養(yǎng)細菌。OD260/280一般在1.8以上。DNA片段長度一般在20-40 Kb左右。
3. 適用范圍廣,可以使用于絕大多數(shù)細菌。也可以使用過夜培養(yǎng)細菌和菌落。
4. 得到的DNA可以直接用于PCR,酶切或其他分子生物學(xué)實驗。
A型適用于G-細菌,B型適用于G+細菌。
將1.0 mL過夜培養(yǎng)的細菌離心沉淀,棄上清,加入0.3 mL溶液A,吹打均勻,加入150 μL 溶液B,顛倒混勻,加入0.2 mL自備氯仿,振蕩混勻半分鐘,室溫13000 rpm離心2分鐘,轉(zhuǎn)移上清到新的離心管中,加入 1.5 倍體積(約0.7 mL)的溶液C+溶液D 的新鮮混合液,顛倒混勻后全部轉(zhuǎn)移到離心吸附柱中,室溫放置至少2 分鐘后轉(zhuǎn)移到離心吸附柱中,室溫放置2分鐘,離心1分鐘,用通用洗柱液洗1-2次后,加50-100 μL DNA洗脫液,室溫離心1分鐘即得DNA溶液。
用本產(chǎn)品提取1.0 mL 過夜培養(yǎng)的E.coli Tg1細菌,DNA最后溶于用0.1 mL DNA洗脫液洗脫,取20 μL上樣。M表示全長的l DNA,其余均為提取的樣品DNA