本產(chǎn)品是在天恩澤自主開發(fā)的一步裂解式超快細菌基因組DNA提取試劑,其最大特點是快速,可以用于絕大多數(shù)革氏陽性和陰性細菌基因組DNA的快速提取。其操作流程如下:
1. 操作簡單,整個過程不到10分鐘(對一個樣品而言)。
2. 產(chǎn)率一般在3-10 μg/mL過液培養(yǎng)細菌。3. OD260/280一般在1.8以上。
4. DNA片段長度一般在40-50 Kb左右。
適用范圍廣,可以用于絕大多數(shù)細菌,也可以使用過夜培養(yǎng)細菌和菌落
對革氏陰性細菌:將1 mL過夜培養(yǎng)的新鮮細菌離心沉淀,棄上清,在細菌沉淀中加0.5 mL一步式細菌裂解液,充分吹打均勻,再加入0.5 mL專用上柱液,混勻全部轉(zhuǎn)移到離心吸附柱中,離心半分鐘。用通用洗柱液洗1-2次后,干甩一次,最后用0.1 mLDNA洗脫液洗脫即得基因組DNA。對革氏陽性細菌,需用溶菌酶預先處理(詳見使用手冊),其余操作不變
圖注:用本產(chǎn)品提取1.0 mL 過夜培養(yǎng)的E.coli Tg1細菌,DNA最后溶于60 μL TE中,取15 μL上樣。樣品DNA位置與全長的 λ DNA相當(λ DNA未在此照片中顯示)。
一步裂解式細菌DNAout和柱式細菌DNAout有何異同?
A: 1. 兩者裂解細菌原理不同,但都是基于離心吸附柱的分離提取方法;2. 前者整個、過程只要不到10分鐘的時間而后者需要20分鐘左右(對一個樣品而言)。3. 前者產(chǎn)量只有后者的50%左右。