本產(chǎn)品是柱式BAC DNAOUT的中提升級(jí)產(chǎn)品,跟柱式BAC DNAOUT一樣,它采用了改良的細(xì)菌裂解和質(zhì)粒DNA上柱條件,確保大型的質(zhì)粒(大至100 Kb的質(zhì)粒)能有效地結(jié)合到硅膠柱中,并可高效地洗脫出來(lái)。其主要區(qū)別是一次的處理量增加了5-10倍。
1. 適用于不超過(guò)100 Kb的大型質(zhì)粒DNA,包括BAC、PAC、P1和Cosmid 等。如果超過(guò)100 Kb,建議使用沉淀法或離子交換法。
2. 可從25 ml 細(xì)菌培養(yǎng)液中純化大型質(zhì)粒DNA。
3. 安全,無(wú)酚氯仿等危險(xiǎn)的有機(jī)物抽提。
4. 柱式操作,比經(jīng)典的沉淀法操作簡(jiǎn)單,重復(fù)性好,每次都能獲得理想效果。
5. 得到的DNA更純凈,可以直接用于酶切、PCR和DNA測(cè)序,不需要再純化。
6. 超值,性價(jià)比高。
收集大約25 mL過(guò)夜培養(yǎng)飽和菌液,離心棄上清后用2 mL溶液A重懸沉淀, 再與2 mL溶液B混勻,再加入4 mL溶液C,混勻,室溫靜止5-10分鐘,離心15分鐘,將上清轉(zhuǎn)移到DNA純化柱中,靜置2分鐘,離心后棄收集管中的廢液,用5 mL 的通用洗柱液洗滌離心柱兩次。干甩一次,將離心柱置于新的離心管(自備)中, 用0.5 mL 65℃預(yù)熱的DNA洗脫液洗脫兩次即得質(zhì)粒DNA。