本產(chǎn)品是自主開發(fā)的革命性的技術(shù),只需要一種溶液瞬間即可以完成細(xì) 菌裂解,并且裂解物可以直接上柱純化質(zhì)粒DNA。它比經(jīng)典的堿變性質(zhì)粒制備方法 更加快捷和方便。其操作流程如下:
本產(chǎn)品的主要特點(diǎn)是:
1. 超快,整個質(zhì)粒DNA提取過程只需要不到10分鐘,比傳統(tǒng)的堿變性方法快捷。
2. 回收率高,可以用單個菌落提取質(zhì)粒,產(chǎn)量一般在3-5 μg/mL飽和菌液。
3. DNA無損傷,使用一步式裂解細(xì)菌技術(shù),避免了強(qiáng)堿對DNA的損害。
4. DNA純度高,幾乎沒有基因組DNA和RNA污染,OD260/280一般在1.7-1.9 之間。DNA可以直接用于電泳、酶切、PCR、細(xì)菌轉(zhuǎn)化、分子克隆等實(shí)驗(yàn)。
重復(fù)性和穩(wěn)定性好。
在0.1-1.5 mL菌液離心得到細(xì)菌沉淀中,加入0.6-1 mL的溶液A,充分吹打混勻后直接上柱,離心后用通用預(yù)洗液和通用洗柱液各洗兩次,干甩一次,最后用30-
100 μL DNA洗脫液洗脫即得質(zhì)粒DNA。
M為DNA marker,1-4號使用含pIRESpuro2質(zhì)粒的菌液,1-2用經(jīng)典法,3-4用本產(chǎn)品。5-8號使用含pIRES2-EGFP質(zhì)粒的菌液,5-6用經(jīng)典法,7-8用本產(chǎn)品。最后用100 μL水洗脫,10 μL用于電泳。電泳染料為綠如藍(lán)核酸染料(實(shí)驗(yàn)編號:107193)。