注:上欄照片為膠原纖維(紅色)。
SYBR Green I,EG是電泳級低毒高靈敏的花青類DNA熒光染料,適用于各種核酸電泳分析。
1. 低毒安全,其致突變性低于EB數(shù)倍甚至數(shù)十倍。
2. 髙靈敏,SYBR Green I與dsDNA結(jié)合,熒光信號會增強(qiáng)800-1000倍,至少可檢出 20 pg DNA,靈敏度高于EB染色法10-25倍。
3. 適用范圍廣,可適用于多種電泳分析,包括瓊脂糖凝膠,聚丙烯酰胺凝膠電泳和毛細(xì)管電泳等。與的SuperBuffer和SuperBuffer-2兼容。
4. 不影響其它修飾酶(如:Taq酶、逆轉(zhuǎn)錄酶、內(nèi)切酶、T4連接酶等)作用。
5. 操作簡單,無須脫色或沖洗。
經(jīng)濟(jì),價格比銀染便宜,每個樣品僅兩分錢。
樣前將DNA樣品與本產(chǎn)品(1×, 加入量為總上樣量的1/10)和上樣緩沖液混合,室溫放置10-15分鐘后按常規(guī)方法上樣、電泳和UV檢查。效果
見右圖。
SYBR Green I是新型的低毒高靈敏核酸染料,它在低濃度時以嵌合方式
(intercalation)與dsDNA結(jié)合,在高濃度時以附著方式與dsDNA的小溝結(jié)合(minor groove binding),兩種非共價的靜電結(jié)合均與溶液中陽離子濃度密切相關(guān)。SYBR Green I與AT-rich DNA的結(jié)合強(qiáng)于GC-rich DNA,與dsDNA的結(jié)合比與ssDNA的結(jié)合強(qiáng)20倍。SYBR Green I和其他花青類核酸染料分子結(jié)
構(gòu)如下:
SYBR Green I的化學(xué)本質(zhì)是
[2-[N-(3-dimethylaminopropyl)- N - p r op y l a m i n o ] -4 - [ 2 , 3 - dihydro-3-methyl-(benzo-1,3- thiazol-2-yl)-methylidene]-1- phenyl-quinolinium]