本試劑盒是從瓊脂糖凝膠中回收DNA片段的試劑盒。試劑盒采用可以高效、專一結(jié)合DNA的硅膠膜和獨(dú)特的溶膠體系。可從TAE、TBE和SuperBuffer凝膠上回 收50 bp-40 Kb的DNA片段,回收效率最高可達(dá)90%。其實(shí)驗(yàn)流程如下
本產(chǎn)品特點(diǎn)是:
1. 高效,回收效率高達(dá)90%。
2. 快速,整個(gè)過程只需要十余分鐘。
3. 純度高,本試劑盒回收的DNA可直接用于酶切、連接、PCR等多種分子生物學(xué)實(shí)驗(yàn)。
4. 用途廣,本試劑盒能回收單鏈、雙鏈及環(huán)狀DNA。
5. 價(jià)格便宜,比國(guó)內(nèi)絕大多數(shù)同種產(chǎn)品的價(jià)格便宜。
儲(chǔ)存方便,試劑盒可以在室溫放置數(shù)月,不影響其質(zhì)量。
在含DNA片段的瓊脂凝膠塊中或DNA反應(yīng)液中,加入加入3倍體積(約0.3-0.5 mL)的通用溶膠液,65℃水溶5-10分鐘,轉(zhuǎn)移溶液到離心吸附柱中,離心半分鐘,加入500-600 μL通用洗柱液,離心半分鐘。重復(fù)洗滌步驟一次。離心半分鐘甩干剩余液體。將離心柱置于新的離心管中,加30-50 μLDNA洗脫液,離心半分鐘, 即得樣品于離心管中。
為何用硅膠膜吸附柱法回收TBE膠中的DNA效果不好? A:因?yàn)門BE中的硼酸會(huì)跟硅膠表面的-OH反應(yīng),而這些-OH又是吸附DNA所必需
的。詳細(xì)解釋請(qǐng)見技術(shù)資料Silica-DNA結(jié)合原理及影響因素