本產(chǎn)品是基于TdT末端轉(zhuǎn)移酶能夠在DNA的3端添加dNTP尾巴的原理設(shè)計(jì),其示意圖如下
本產(chǎn)品在上述原理的基礎(chǔ)上本產(chǎn)品的特點(diǎn)是:
1. 快速,10分鐘即可完成標(biāo)記反應(yīng)。
2. 尤其適合于標(biāo)記Oligo探針。
3. 能在每個(gè)分子的末端標(biāo)記5-10個(gè)左右的標(biāo)記物。
4. 可用于各種同位素標(biāo)記和其他任何非同位素標(biāo)記(80918A,但需自備標(biāo)記底物,底物包括fluorescein-dUTP、hydroxycoumarin-dUTP、resorufin- dUTP和aminoallyl-dUTP)、其中80918B和80918C可直接用于生物素和地高辛標(biāo)記,不需自備標(biāo)記底物。
5. 通過摻入非標(biāo)記核苷酸以控制標(biāo)記的密度,減少空間阻礙,增加靈敏度。
6. 可以用于Southern 和Northern Blot、原位雜交、菌落和斑點(diǎn)印跡雜交等分析。
使用及效果
將0.1-0.2 nmol的DNA(包括Oligo)、4 μL 5×Tailing Buffer A、4 μL 5×Tailing Buffer B、1 μL標(biāo)記的核苷酸(自備或試劑盒提供)和1 μL TdT末端轉(zhuǎn)移酶,補(bǔ)水到20 μL,37℃ 保溫15分鐘后放冰上,使用時(shí)直接加入到雜交液中。