丙酮酸激酶,是紅細(xì)胞葡萄糖無氧酵解途經(jīng)中三個(gè)限速酶之一,直接關(guān)系著紅細(xì)胞能量代謝,此酶缺乏屬常染色體隱性遺傳,可能導(dǎo)致非球形紅細(xì)胞溶血性貧血.丙酮酸激酶的功能是在糖直接酵解過程中起催化作用,將磷酸烯醇丙酮酸的磷酸遞給二磷酸腺苷,使之磷酸化為高能量的三磷酸腺苷.丙酮酸激酶缺乏能使ATP的生成減少,因而影響紅細(xì)胞膜得到功能,如果約定縮短紅細(xì)胞的生存時(shí)間,造成溶血性貧血.同時(shí)血清丙酮酸激酶對判斷心肌損傷也有很高的科研意義.
產(chǎn)品優(yōu)點(diǎn)如下:
1、快速簡便:速率法,30分鐘可完成20-40例樣本的測定。
2、取樣量微:取樣量僅為20l左右
3、穩(wěn)定性好:試劑盒2~8℃存放3個(gè)月有效。
4、再現(xiàn)性好:變異系數(shù)CV=1.7%。
5、回收試驗(yàn): X =101%。
6、受外界影響因素小:干擾因素少,重復(fù)性強(qiáng)。
7、測試面廣:可測各種動物血清(漿)、組織等
所需儀器及自備試劑:
1、紫外分光光度計(jì)(比色測定波長為340nm)
2、恒溫水浴箱或氣浴箱 (孵育溫度為37℃)
3、漩渦混勻器
4、微量移液器
樣本收集與前處理:
血清(漿)可直接測定。
動物組織樣本:可用生理鹽水按重量體積比制備成組織勻漿液,離心取上清測定。
具體的樣本前處理:參考我們隨貨發(fā)送的《實(shí)驗(yàn)方法學(xué)》以及試劑盒中詳細(xì)說明書。
操作流程:
1、取已預(yù)溫10分鐘的混合試劑加20l樣本
2、340nm波長,0.5cm光徑測OD值為A1
3、37℃水浴15分鐘后,340nm波長,0.5cm光徑測OD值為A2