超氧化物歧化酶對(duì)機(jī)體的氧化與抗氧化平衡起著至關(guān)重要的作用。此酶能清除超氧陰離子自由基,保護(hù)細(xì)胞免受損傷,本試劑盒采用黃嘌呤氧化酶法(羥胺法)測(cè)定SOD活力。可測(cè)血清(漿)、腦脊液、胸水、腹水、腎透析液、尿液、精液、紅細(xì)胞、白細(xì)胞、血小板、心肌培養(yǎng)細(xì)胞、腫瘤培養(yǎng)細(xì)胞、各種動(dòng)植物組織細(xì)胞、及亞細(xì)胞水平(線粒體、微粒體)中的SOD活力,并可檢測(cè)微生物、藥物、食品、飲料、化妝品中的SOD活力。既可測(cè)總SOD又可測(cè)錳-SOD及銅鋅-SOD。
產(chǎn)品優(yōu)點(diǎn)如下:
1、快速簡(jiǎn)便:全程約50分鐘,可測(cè)100例左右樣本。
2、取樣量微:本法取手指或耳垂等末梢血20l~50l即可測(cè)紅細(xì)胞中的SOD,只需2ml靜脈血可測(cè)白細(xì)胞中的SOD及血小板中SOD,只需5mg左右組織就可測(cè)組織勻漿、胞漿中的SOD、0.2g組織可測(cè)線粒體及微粒體中的SOD。
3、靈敏度高:IC50=0.05g/ml,是鄰苯三酚法的18倍。
4、穩(wěn)定性好:試劑盒2~8℃存放6個(gè)月有效。
5、再現(xiàn)性好:變異系數(shù)CV=1.7%。
6、回收試驗(yàn): X =103.3%。
7、受外界影響因素小:干擾因素少,重復(fù)性強(qiáng)。
8、測(cè)試面廣:可測(cè)動(dòng)物血液、組織、各種體液、灌流液等、各種培養(yǎng)細(xì)胞、細(xì)菌、植物組織、各種水產(chǎn)以及化妝品、保健品等,效果均佳。
儀器:
1、分光光度計(jì)/酶標(biāo)儀/半自動(dòng)生化分析儀(比色測(cè)定波長(zhǎng)為550nm)
2、恒溫水浴箱或氣浴箱 (孵育溫度為37℃)
3、臺(tái)式離心機(jī)
4、漩渦混勻器
5、微量移液器
樣本收集與前處理:
血清(漿)可直接測(cè)定。
紅細(xì)胞:需按照試劑盒中說(shuō)明書上紅細(xì)胞的測(cè)定方法進(jìn)行提取后測(cè)定。
動(dòng)物組織樣本:可用生理鹽水按重量體積比制備成組織勻漿液,離心取上清測(cè)定。
培養(yǎng)細(xì)胞、細(xì)菌、植物組織:常用PBS作為勻漿介質(zhì)破碎后離心取上清測(cè)定。
具體的樣本前處理:參考我們隨貨發(fā)送的《實(shí)驗(yàn)方法學(xué)》以及試劑盒中詳細(xì)說(shuō)明書。
操作流程:
1、按步驟加入樣本和試劑
2、漩渦混勻,37℃孵育40分鐘
3、加入顯色劑顯色,室溫靜置10分鐘
4、550nm波長(zhǎng),1cm光徑,比色