腺苷脫氨酶廣泛分布于各組織中。盲腸、小腸粘膜和脾中含量最高,肝中含量僅為小腸的7%-14%,肝臟中90%在細胞質(zhì)中,細胞核含量低,但卻是胞核中有關核酸代謝酶中含量最高的一個。在肝臟疾病中,ADA活性增高。阻塞性黃疸時此酶活性一般不升高,而在肝實質(zhì)損傷時,此酶和ALT同時升高,幫有助于鑒別。在慢性活動性肝炎和肝硬化時ALT陽性率較低,而ADA陽性率可達90%左右,增高較明顯。
腺苷脫氨酶ADA催化腺嘌呤核苷水解,產(chǎn)生次黃嘌呤核苷和氨,然后對產(chǎn)生的氨進行顯色,從而可以計算血清ADA的活性。
產(chǎn)品優(yōu)點如下:
1、快速簡便:全程約2小時,可測100例左右樣本。
2、取樣量微:本法取樣本量僅為20l
3、穩(wěn)定性好:試劑盒2~8℃存放3個月有效。
4、再現(xiàn)性好:變異系數(shù)CV=1.7%。
5、回收試驗: X =102%。
6、受外界影響因素小:干擾因素少,重復性強。
7、測試面廣:可測動物組織、血清等,效果均佳。
所需儀器及自備試劑:
1、分光光度計/酶標儀/半自動生化分析儀(比色測定波長為640nm)
2、恒溫水浴箱或氣浴箱 (孵育溫度為37℃)
3、臺式離心機
4、漩渦混勻器
5、微量移液器
樣本收集與前處理:
血清(漿)可直接測定。
動物組織樣本:可用生理鹽水按重量體積比制備成組織勻漿液,離心取上清測定。
具體的樣本前處理:參考我們隨貨發(fā)送的《實驗方法學》以及試劑盒中詳細說明書。
操作流程:
1、按步驟加入樣本和R1
2、漩渦混勻,37℃孵育1小時
3、加入R2、R3,37℃孵育30分鐘后,室溫放置10分鐘
4、640nm波長,1cm光徑,比色