葡萄糖-6-磷酸脫氫酶測定是研究葡萄糖-6-磷酸脫氫酶缺乏癥的主要方法,當(dāng)其測定結(jié)果低于正常時,常作為數(shù)葡萄糖-6-磷酸脫氫酶缺乏癥的研究依據(jù)。通過葡萄糖-6-磷酸脫氫酶的測定,對于研究藥物試驗引起的溶血性貧血具有極高的科研價值。
正常血紅蛋白是亞鐵血紅蛋白,可被氧化成為高鐵血紅蛋白,當(dāng)紅細胞內(nèi)G-6-PD含量正常時,通過戊糖代謝旁路形成的NADPH可作為血液中高鐵血紅 蛋白還原酶的輔酶,并在遞氫體的參與下,高鐵血紅蛋白還原為亞鐵血紅蛋白。當(dāng)紅細胞內(nèi)缺少G-6-PD時,高鐵血紅蛋白不能被還原,通過測定高鐵血紅蛋白 的吸光度,可算出G-6-PD的活力高低。
產(chǎn)品優(yōu)點如下:
1、穩(wěn)定性好:試劑盒2~8℃存放6個月有效。
2、再現(xiàn)性好:變異系數(shù)CV=1.3%。
3、回收試驗: X =102%。
4、受外界影響因素小:干擾因素少,重復(fù)性強。
所需儀器及自備試劑:
1、分光光度計/酶標(biāo)儀/半自動生化分析儀(比色測定波長為640nm)
2、恒溫水浴箱或氣浴箱 (孵育溫度為37℃)
3、臺式離心機
4、漩渦混勻器
5、微量移液器
樣本收集與前處理:
紅細胞:需按照試劑盒中說明書上紅細胞的測定方法進行提取后測定。
具體的樣本前處理:參考我們隨貨發(fā)送的《實驗方法學(xué)》以及試劑盒中詳細說明書。
操作流程:
1、按步驟加入樣本和R1、R2
2、漩渦混勻,加塞37℃孵育3小時
3、取以上混合液50l,加入R3, 3000轉(zhuǎn)/分鐘離心10分鐘
4、取上清,550nm波長,1cm光徑,比色