維生素E(VE)是天然脂溶性抗氧化劑,它存在細(xì)胞膜性結(jié)構(gòu)中(細(xì)胞膜、線粒體、微粒體)以及脂肪細(xì)胞的脂滴和循環(huán)的脂蛋白中。
VE不但是單線態(tài)氧和超氧陰離子自由基的清除劑,更重要的是脂質(zhì)過氧化作用的阻斷劑。從細(xì)胞水平的許多實(shí)驗(yàn)說明維生素E和So GSHPX協(xié)同地保護(hù)細(xì)胞免受脂質(zhì)過氧化損傷。VE 尚能直接與蛋白硫自由基(pros)偶聯(lián),使蛋白巰基恢復(fù)活性,VE也可通過清除LOO間接地防止蛋白巰基喪失。而蛋白巰基是維護(hù)細(xì)胞生存的重要環(huán)節(jié),因而VE是機(jī)體抗氧化的第一道防線。當(dāng)維生素E缺乏時(shí),機(jī)體易受到自由基的攻擊而表現(xiàn)出各種病理狀態(tài)。例如:老年性白內(nèi)障、早衰等。
產(chǎn)品優(yōu)點(diǎn)如下:
1、快速簡(jiǎn)便:全程約30分鐘,可測(cè)50例左右樣本。
2、穩(wěn)定性好:試劑盒2~8℃存放3個(gè)月有效。
3、再現(xiàn)性好:變異系數(shù)CV=1.7%。
4、回收試驗(yàn): X =103.3%。
5、受外界影響因素小:干擾因素少,重復(fù)性強(qiáng)。
6、測(cè)試面廣:可測(cè)動(dòng)物血清(漿)、組織、藥物、飲料、口服液、食品等,效果均佳
所需儀器及自備試劑:
1、分光光度計(jì)/酶標(biāo)儀/半自動(dòng)生化分析儀(比色測(cè)定波長(zhǎng)為533nm)
2、臺(tái)式離心機(jī)
3、漩渦混勻器
4、微量移液器
樣本收集與前處理:
血清(漿)可直接測(cè)定。
動(dòng)物組織樣本:用試劑盒中的R4作為勻漿介質(zhì)按重量體積比制備成組織勻漿液,離心取上清測(cè)定。
植物組織:用試劑盒中的R4作為勻漿介質(zhì)破碎后離心取上清測(cè)定。
具體的樣本前處理:參考我們隨貨發(fā)送的《實(shí)驗(yàn)方法學(xué)》以及試劑盒中詳細(xì)說明書。
操作流程:
1、維生素E的抽提:按步驟加入樣本和試劑,抽提1分鐘,混勻,3500~4000轉(zhuǎn)/分,離心10分鐘,取上清0.8ml待測(cè)
2、顯色反應(yīng):按操作表加入相應(yīng)的試劑,混勻,室溫靜置2分鐘,待測(cè)
3、533nm波長(zhǎng),1cm光徑,無水乙醇調(diào)零比色