H+、K+－ATPase對(duì)胃酸的分泌及胃的消化功能具有重要的生理意義。70年代Forte等人首先在牛蛙胃粘膜上分離出一類能被K＋專一激活而不被烏本苷抑制的ATPase，即H+、K+－ATPase。隨后Lee·J等人又證明了含有該酶的膜囊泡運(yùn)動(dòng)跨膜運(yùn)輸質(zhì)子的作用，從而為胃酸分泌的機(jī)理奠定了分子學(xué)基礎(chǔ)。H＋、K＋-ATPase定位于胃粘膜壁細(xì)胞上，屬于第二類質(zhì)子泵，它通過自身的磷酸化（E1→E2）與去磷酸化（E2→E1）完成的H＋/K＋電中性跨膜離子轉(zhuǎn)運(yùn)，不斷將壁細(xì)胞內(nèi)的質(zhì)子運(yùn)輸?shù)侥ね庑惺姑谒岬墓δ堋?/span>
ATP酶可分解ATP生成ADP及無機(jī)磷，測(cè)定無機(jī)磷的量可判斷ATP酶活力的高低。
H＋K＋—ATP酶是一種能被鉀專一激活而不被烏本苷抑制的ATP酶。
產(chǎn)品優(yōu)點(diǎn)如下：
1、快速簡(jiǎn)便：全程約50分鐘，可測(cè)100例左右樣本。
2、取樣量微：本法取樣本量100ul。
3、穩(wěn)定性好：試劑盒2～8℃存放6個(gè)月有效。
4、再現(xiàn)性好：變異系數(shù)CV=1.7%。
5、回收試驗(yàn)： X =103.3%。
6、受外界影響因素小：干擾因素少，重復(fù)性強(qiáng)。
7、測(cè)試面廣：可測(cè)動(dòng)物組織、紅細(xì)胞以及各種培養(yǎng)細(xì)胞、各種水產(chǎn)等，效果均佳。
所需儀器及自備試劑：
1、分光光度計(jì)/酶標(biāo)儀/半自動(dòng)生化分析儀（比色測(cè)定波長(zhǎng)為660nm）
2、恒溫水浴箱或氣浴箱 （孵育溫度為37℃和45℃）
3、臺(tái)式離心機(jī)
4、漩渦混勻器
5、微量移液器
樣本收集與前處理：
紅細(xì)胞：需按照試劑盒中說明書上紅細(xì)胞的測(cè)定方法進(jìn)行提取后測(cè)定。
動(dòng)物組織樣本：可用生理鹽水按重量體積比制備成組織勻漿液，離心取上清測(cè)定。
培養(yǎng)細(xì)胞：常用PBS作為勻漿介質(zhì)破碎后離心取上清測(cè)定。
具體的樣本前處理：參考我們隨貨發(fā)送的《實(shí)驗(yàn)方法學(xué)》以及試劑盒中詳細(xì)說明書。
操作流程：
1、酶促反應(yīng)：按說明操作加入樣本100l和混合試劑，37℃準(zhǔn)確反應(yīng)10分鐘
2、加R7，3500轉(zhuǎn)/分，離心10分鐘，取上清
3、定磷：取上清液加入定磷劑，45℃水浴5分鐘
4、660nm波長(zhǎng)，1cm光徑，比色
