- 介紹： 基 因 型F-φ80 lac ZΔM15 Δ(lacZYA-arg F) U169 endA1 recA1 hsdR17(rk-,mk+) supE44λ- thi -1 gyrA96 relA1 phoA簡 要 說 明DH5α菌株是實驗室最常用的感受態(tài)細胞。 缺失核酸內切酶(endA)，提高了質粒DNA的產量和質量；重組酶缺陷型(recA)減少插入片段的同源重組概率，保證了插入DNA的穩(wěn)定性；lacZΔM15的存在使DH5α可用于藍、白斑篩選。DH5α菌株的缺點是生長緩慢，37℃需培12-14小時才能看見克隆；如需加快試驗速度，請選用TG1，Mach1-T1，XL10-Gold等生長速度快的感受態(tài)細胞。High5TM系列DH5α感受態(tài)細胞經特殊工藝制作，經pUC19質粒檢測轉化效率約1×109cfu/μg。操 作 說 明1.DH5α感受態(tài)細胞放置冰中融化（或放手心或室溫片刻，待菌體處于冰水混合狀態(tài)時迅速插入冰中），加入目的DNA（質�；蜻B接產物）并用手撥打EP管底輕輕混勻，冰上靜置25分鐘。2.42℃水浴熱激45秒，迅速放回冰上并靜置2分鐘，晃動會降低轉化效率。3.向離心管中加入700μl不含抗生素的無菌培養(yǎng)基（2YT或LB），混勻后37℃，200 rpm復蘇60分鐘。4.5000rpm離心一分鐘收菌，留取100μl左右上清輕輕吹打重懸菌塊并涂布到含相應抗生素的2YT或LB培養(yǎng)基上。5.將平板倒置放于37℃培養(yǎng)箱過夜培養(yǎng)。如果進行藍白斑篩選操作，將平板放37℃培養(yǎng)至少17h。注 意 事 項1.感受態(tài)細胞最好在冰上融化。冰上放置大約5分鐘即可融化，融化后8分鐘內加入質粒， 否則會影響轉化效率。2.混入質粒或連接產物時應輕柔操作。3.轉化高濃度的質�；蚋咝实倪B接產物可相應減少最終用于涂板的菌量。
- 儲存條件： -80℃
- 用途： 克隆感受態(tài)細胞
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