滾環(huán)擴(kuò)增（rolling circle amplification，RCA）是近幾年發(fā)展起來(lái)的一種核酸恒溫?cái)U(kuò)增方法。以環(huán)狀DNA為模板，通過(guò)一個(gè)短的DNA引物（與部分環(huán)狀模板互補(bǔ)），在phi29 DNA 聚合酶催化下將dNTPs轉(zhuǎn)變成單鏈DNA，此單鏈DNA包含成百上千個(gè)重復(fù)的模板互補(bǔ)片段。這種方法不僅可以直接擴(kuò)增DNA和RNA，還可以實(shí)現(xiàn)對(duì)靶核酸的信號(hào)放大，靈敏度達(dá)到一個(gè)拷貝的核酸分子，因此在核酸檢測(cè)中具有很大的應(yīng)用價(jià)值和潛力。 因其高靈敏度、高特異性和可操作性，RCA技術(shù)在基礎(chǔ)研究、實(shí)際檢測(cè)、醫(yī)療診斷及納米材料等方面都有很好的應(yīng)用，結(jié)合細(xì)胞原位檢測(cè)、單核苷酸多態(tài)性SNPs，蛋白質(zhì)分析、免疫芯片和全基因組的擴(kuò)增等研究都能發(fā)揮其巨大的優(yōu)勢(shì)。
本滾環(huán)擴(kuò)增試劑盒配備的phi29 DNA聚合酶具有鏈置換和連續(xù)合成特性，可連續(xù)合成長(zhǎng)達(dá)70kb的DNA片段。另外，該酶具有3’→5’外切酶校讀功能，合成的DNA片段保真性高。試劑盒配備的Random Hexamers為6堿基隨機(jī)引物可對(duì)目標(biāo)分子進(jìn)行指數(shù)放大（通常放大10000倍）。
主要特征
高靈敏度：?jiǎn)我颮CA的擴(kuò)增效率成指數(shù)擴(kuò)大，可達(dá)104-105。
操作簡(jiǎn)單：恒溫?cái)U(kuò)增，程序簡(jiǎn)單化。
儀器簡(jiǎn)單：只需維持恒溫的水浴鍋。
應(yīng)用廣泛：可廣泛應(yīng)用于基礎(chǔ)研究和醫(yī)療診斷等領(lǐng)域。
儲(chǔ)存 ：-20℃可保存3年，避免反復(fù)凍融。
功能測(cè)試：如下圖
