包裝:5ml(可用于50張片子)
適用:一抗來(lái)源于小鼠或兔子
顯色底物:DAB (聯(lián)苯二胺)
試劑組成:
組分編號(hào) | 組分名稱 | 規(guī)格 | 數(shù)量 |
A | 過(guò)氧化氫 | 5ml | 1 |
B | 超級(jí)封閉液 | 5ml | 1 |
C | 一抗放大劑 | 5ml | 1 |
D | 酶標(biāo)二抗聚合物 | 5ml | 1 |
E | DAB A液 | 5ml | 1 |
F | DAB B液 | 160ul | 1 |
未提供但必需試劑:一抗(來(lái)源于小鼠或兔子)、PBS (磷酸鹽緩沖液)
本試劑盒是基于聚合物技術(shù)的最新一代免疫組化二抗非生物素檢測(cè)系統(tǒng),信號(hào)更強(qiáng)、操作更加簡(jiǎn)單。 與傳統(tǒng)的免疫組化二抗試劑盒相比,具有3個(gè)特點(diǎn):一是由于聚合物的獨(dú)到之處,使得酶分子與二抗IgG分子直接結(jié)合形成的多聚物分子高度敏感性,有效減少了一抗使用量,一抗試劑可再稀釋2-4倍;二是由于避免了生物素的使用,從而可以避免由于生物素引起的非特異性背景顯色,得到更清晰的顯色和更干凈的背景;三是快速,更短的試劑孵育時(shí)間。
儲(chǔ)存及有效期
2-8°C保存。每個(gè)組分至少可以保存18個(gè)月。
操作步驟:
說(shuō)明:所有的步驟在室溫下操作,加試劑可以直接滴瓶滴定,也可以用移液器,一滴=30-40ul
1. 脫蠟、水化組織切片
2. PBS洗2-3次各5分鐘
3. 根據(jù)所應(yīng)用的一抗的特殊要求,對(duì)組織切片進(jìn)行預(yù)處理
4. PBS洗2-3次各5分鐘
5. 加入100ul A 液孵育十分鐘,阻斷內(nèi)源性過(guò)氧化物酶,以減少非特異性背景染色
6. PBS洗2-3次各5分鐘
7. 加入100ul B 液孵育五分鐘來(lái)減少非特異性染色。注意:此步驟不要超過(guò)十分鐘;如果一抗在含有5%至10%正常山羊血清的緩沖液中稀釋,則此步驟可以省略
8. PBS洗2-3次各5分鐘
9. 加一抗,室溫或37℃孵育20分鐘
10. PBS洗2-3次各5分鐘
11. 加入100ul C 液孵育十分鐘
12. PBS洗2-3次各5分鐘
13. 加入100ul D 液孵育十分鐘.注意:此液對(duì)光敏感,注意避光
14. PBS洗2-3次各5分鐘
15. 配制新鮮底物液:將30ul的 F 液和1ml的 E 液充分混合,即配制成新鮮底物液(該底物液可存放2周)
16. 加入100ul新鮮底物液, 孵育五分鐘
17. 去離子水沖洗
18. 復(fù)染,封片