茜素紅S染色是一種常用的染色方法，廣泛用于成骨細(xì)胞分化、骨細(xì)胞或組織病理生理的研究。

茜素紅S是一種蒽醌類衍生物，能和多種金屬離子螯合生成穩(wěn)定的橙紅色或深紅色的復(fù)合物，是一種良好的金屬指示劑，也可作為吸光度法測定金屬離子的顯色劑，還可作為酸堿指示劑，或用于極譜法測定金屬離子。

針對不同樣品特點(diǎn)，全新推出一系列茜素紅S染色液產(chǎn)品，利用染色液酸堿性和濃度的區(qū)別，可以分別對細(xì)胞外基質(zhì)鈣質(zhì)沉積、細(xì)胞內(nèi)鈣質(zhì)沉積和成骨細(xì)胞礦化結(jié)節(jié)鈣質(zhì)進(jìn)行染色，方便您根據(jù)實(shí)際需求進(jìn)行選購。
染色原理：
茜素紅S可與碳酸鈣或磷酸鈣中的鈣鹽螯合形成橙紅色復(fù)合物，常用于染色或定位組織中的鈣質(zhì)沉積。其中酸性染色液適用于骨、軟骨等細(xì)胞外基質(zhì)鈣質(zhì)沉積染色；細(xì)胞內(nèi)鈣質(zhì)沉積量比較少，酸性染色液可能會使鈣質(zhì)溶解，導(dǎo)致染色效果差甚至假陰性，因此一般采用堿性染色液，同時(shí)堿性染色液可以增加染色時(shí)間，從而獲得比較滿意的染色效果。

染色效果：

圖1. 茜素紅S染色液(2%, pH4.2)用于小鼠尾椎骨石蠟切片的染色效果圖。如圖所示，鈣鹽沉積處顯橙紅色。注：實(shí)際染色效果會因樣品及實(shí)驗(yàn)條件的不同而存在差異，本圖僅供參考。

圖2. 茜素紅S染色液(0.2%, pH8.3)用于MC3T3-E1(小鼠胚胎成骨細(xì)胞前體細(xì)胞)細(xì)胞誘導(dǎo)分化后的染色效果圖。如圖所示，鈣鹽沉積處顯紫紅色。注：實(shí)際染色效果會因樣品及實(shí)驗(yàn)條件的不同而存在差異，本圖僅供參考。

圖3. 成骨細(xì)胞礦化結(jié)節(jié)染色試劑盒(茜素紅S法)用于MC3T3-E1細(xì)胞誘導(dǎo)分化后的染色效果圖。如圖所示，經(jīng)本試劑盒染色后，MC3T3-E1細(xì)胞礦化結(jié)節(jié)鈣鹽沉積處顯橙紅色。實(shí)際染色效果會因樣品及實(shí)驗(yàn)條件的不同而存在差異，本圖僅供參考。
 

茜素紅S染色液(0.2%, pH8.3) (0.2% Alizarin Red S Staining Solution, pH8.3)是一種方便快捷的用于檢測鈣鹽沉積的染色液，適用于細(xì)胞內(nèi)鈣質(zhì)沉積的染色。

鈣是動物體內(nèi)含量最高的無機(jī)鹽，是構(gòu)成骨骼和牙齒的主要礦物質(zhì)成分，還參與肌肉收縮、神經(jīng)傳導(dǎo)等眾多生理過程。正常狀態(tài)下，鈣不以固體狀態(tài)出現(xiàn)在骨骼和牙齒之外的組織中，但病理狀態(tài)下，鈣形成碳酸鈣、磷酸鈣等鈣鹽析出并沉著于組織內(nèi)。

茜素紅S染色是一種常用的染色方法，廣泛用于成骨細(xì)胞分化、骨細(xì)胞或組織病理生理的研究。茜素紅S (Alizarin Red S, 簡稱ARS)，別名茜素磺酸鈉、茜素胭脂紅，CAS號為130-22-3，分子式為C₁₄H₇NaO₇S，分子量為342.25。茜素紅S是一種蒽醌類衍生物，能和多種金屬離子螯合生成穩(wěn)定的橙紅色或深紅色的復(fù)合物，是一種良好的金屬指示劑，也可作為吸光度法測定金屬離子的顯色劑，還可作為酸堿指示劑，或用于極譜法測定金屬離子。在組織學(xué)和組織病理學(xué)中，由于茜素紅S可與碳酸鈣或磷酸鈣中的鈣鹽螯合形成橙紅色復(fù)合物，而常用于染色或定位組織中的鈣質(zhì)沉積。

本產(chǎn)品中的茜素紅S濃度為0.2%，pH8.3，呈堿性，適用于細(xì)胞內(nèi)鈣質(zhì)沉積的染色，例如血管鈣化、骨骼肌的鈣化、其它異位鈣化的染色以及培養(yǎng)的細(xì)胞鈣質(zhì)沉積的鑒定。細(xì)胞內(nèi)鈣質(zhì)沉積一般量比較少，酸性的染色液可能會使鈣質(zhì)溶解，導(dǎo)致染色效果差甚至假陰性，所以一般采用堿性的染色液；而且堿性的染色液通常可以增加染色時(shí)間，以此獲得比較滿意的染色效果。針對不同樣品的特點(diǎn)，三種茜素紅S染色液，具體請參考下表選擇合適的染色液。

本產(chǎn)品用于MC3T3-E1 (小鼠胚胎成骨細(xì)胞前體細(xì)胞)細(xì)胞誘導(dǎo)分化后的染色效果參考圖1。

圖1. 茜素紅S染色液(0.2%, pH8.3)用于MC3T3-E1(小鼠胚胎成骨細(xì)胞前體細(xì)胞)細(xì)胞誘導(dǎo)分化后的染色效果圖。如圖所示，鈣鹽沉積處顯紫紅色。注：實(shí)際染色效果會因樣品及實(shí)驗(yàn)條件的不同而存在差異，本圖僅供參考。

按照每個(gè)切片使用100µl染色液來計(jì)算，本產(chǎn)品100ml的包裝可以用于1000個(gè)切片的染色。

保存條件：

室溫避光保存，至少一年有效。

注意事項(xiàng)：

需用戶自備的試劑：乙醇、蒸餾水、二甲苯。

根據(jù)樣品的特點(diǎn)選擇相應(yīng)的茜素紅S染色液，也可進(jìn)行預(yù)實(shí)驗(yàn)以選擇最佳的染色液。

本產(chǎn)品僅限于專業(yè)人員的科學(xué)研究用，不得用于臨床診斷或治療，不得用于食品或藥品，不得存放于普通住宅內(nèi)。

為了您的安全和健康，請穿實(shí)驗(yàn)服并戴一次性手套操作。

使用說明：
1.樣品處理：
a．對于石蠟切片：
石蠟切片的制備：按照常規(guī)方法進(jìn)行取材、固定、洗滌、脫水、透明、浸蠟、包埋、切片、烘片等步驟制備石蠟切片。
二甲苯中脫蠟5-10分鐘。
換用新鮮的二甲苯，再脫蠟5-10分鐘。
無水乙醇5分鐘。
90%乙醇2分鐘。
80%乙醇2分鐘。
70%乙醇2分鐘。
b. 對于細(xì)胞：
用PBS洗三次。
95%乙醇固定10分鐘。
PBS洗三次。
2.茜素紅S染色：
a.對于石蠟切片：加入茜素紅S染色液浸染5-10分鐘，蒸餾水充分洗滌，常規(guī)水化透明封片，隨后即可在顯微鏡下觀察和拍照。
注：茜素紅S染色液的染色時(shí)間需根據(jù)樣品鈣鹽的含量來確定，染色過程中應(yīng)隨時(shí)在顯微鏡下觀察，觀察到鈣鹽呈較深的橙紅色即可取出水洗。通常染色5分鐘即可，如染色時(shí)間過長，可能會出現(xiàn)彌散現(xiàn)象。
b.對于細(xì)胞：加入適量茜素紅S染色液，37℃烘箱孵育30分鐘，蒸餾水充分洗滌，隨后即可在顯微鏡下觀察和拍照。
3.蘇木素復(fù)染(選做)：
根據(jù)實(shí)驗(yàn)的具體需要，可以考慮選擇進(jìn)行復(fù)染