描述
PureLink™ 病毒 RNA/DNA 小量提取試劑盒 (PureLink™ Viral RNA/DNA Mini Kit) 是核酸純化系統(tǒng),設(shè)計用于從無細(xì)胞樣品,比如血清、血漿和腦脊液快速簡單地分離病毒 RNA 或 DNA。 起始樣品體積可以高達(dá) 500 µl,洗脫體積低至 10 µl,從而將核酸濃縮 50 倍。 使用 PureLink™ 病毒 RNA/DNA 小量提取試劑盒 (PureLink™ Viral RNA/ DNA Mini Kit) 可獲得更高的靶標(biāo)濃度,從而為下游檢測過程比如實(shí)時定量 PCR 或終點(diǎn)分析提供更高的靈敏度和精確度。 專門配制的緩沖液可純化 RNA 或 DNA,使一個系統(tǒng)能用于所有病毒提取樣品。 此外,試劑盒提供足夠量的裂解緩沖液,可以處理大體積的起始樣品。
優(yōu)勢:
• 獲得高度濃縮的病毒核酸,檢測的靈敏度更高 - 起始樣品 500 µl,洗脫體積僅 10 µl
•一個試劑盒提供病毒提取的完整方案 - RNA 和 DNA 病毒均能提取和濃縮
•離心柱技術(shù) - 實(shí)現(xiàn)方便快捷的純化,兼具卓越的可重復(fù)性(圖 1)
•產(chǎn)生高質(zhì)量的 DNA 和 RNA - 非常適合下游應(yīng)用,例如實(shí)時 PCR 和終點(diǎn)分析
由 PureLink™ 病毒 RNA/DNA 小量提取試劑盒 (PureLink™ Viral RNA/DNA Mini Kit) 制備的樣品的 Ct 值普遍較低(圖 2),說明靈敏度更高。
此外,定量可以精確到 20 pfu,而用由 Q 供應(yīng)商提供的試劑盒制備的樣品,只能精確定量到 200 pfu。 結(jié)果表明病毒 RNA 的回收率增加,并且定量擴(kuò)增的整體一致性更好。
與使用來自 Q 供應(yīng)商的試劑盒獲得的樣品相比,用 PureLink ™ 病毒 RNA/DNA 小量提取試劑盒制備的 DNA 的 Ct 值更低(圖 3),說明病毒 DNA 檢測的靈敏度更高。 數(shù)據(jù)表明 PureLink™ 病毒 RNA/DNA 小量提取微型試劑盒與競爭者’的試劑盒相比,能以顯著降低的 Ct 值回收低至 20 pfu 的 DNA。
PureLink™ 病毒 RNA/DNA 小量提取試劑盒與 EZ1 試劑盒相比,產(chǎn)生的靶標(biāo)分子的 Ct 值普遍較低;在某些情況下提前長達(dá) 4 個循環(huán)(圖 4)。 箭頭表示未能產(chǎn)生 Ct 值的樣品。 用 BioRobot EZ1 處理時,48 個樣品中共有 14 個未能產(chǎn)生 Ct (29%),而使用 PureLink™ 病毒 RNA/DNA 試劑盒時,未能產(chǎn)生 Ct 值的僅有 3 個樣品 (6%),用 EZ1 試劑盒從這三個樣品提取的重復(fù)也均未能產(chǎn)生 Ct 值。
已經(jīng)證明,與供應(yīng)商推薦體積的競爭產(chǎn)品相比,PureLink™ 病毒 RNA/DNA 小量提取試劑盒產(chǎn)生的 Ct 值更低,并且核酸回收率更高,因此病毒 RNA 或 DNA 的檢測效果更好。 PureLink™ 病毒 RNA/DNA 小量提取試劑盒在樣品體積、洗脫體積和病毒類型方面的靈活性使其成為純化病毒 RNA 或 DNA 的最佳方案。
組成和儲存:
PureLink™ 病毒 RNA/DNA 小量提取試劑盒包含收集管、裝于收集管中的微型離心柱、回收管、凍干載體 RNA、蛋白酶 K、裂解緩沖液、5X 洗滌緩沖液 II 和無 RNase 的水。 每個試劑盒都包含足夠用于 50 次純化的材料。 試劑盒以室溫條件運(yùn)輸;收到后應(yīng)立即將凍干載體 RNA 保存于 -20°C,將蛋白酶 K 保存于 4°C。如果按照說明保存,試劑盒在 1 年內(nèi)穩(wěn)定。