注意:正式測定之前選擇2-3個預(yù)期差異大的樣本做預(yù)測定。
土壤汞(S-Hg )濃度檢測試劑盒測定意義:
土壤汞污染能夠通過食物鏈傳遞和富集,對植物、動物和人類健康產(chǎn)生威脅。礦山開發(fā)、工業(yè)加工、農(nóng)業(yè)生產(chǎn)和生活垃圾常常造成土壤汞污染,因此評價和防止土壤重金屬污染常常需要測定土壤汞含量。
測定原理:
土壤經(jīng)消化后,汞以Hg2+離子形式存在;Hg2+能與二硫腙生成橙色絡(luò)合物,溶于三氯甲烷后,在490nm測定吸光度,即可計算S-Hg含量。
自備儀器和用品:
可見分光光度計、1mL 玻璃比色皿、恒溫水浴鍋、可調(diào)式移液槍、100 目篩(可更小)、濃硫酸、濃鹽酸、濃硝酸、三氯甲烷和蒸餾水。
試劑組成和配制:
標準品:液體×1 支,4nmol/mL Hg 標準液,4℃保存。
試劑一:自備。提供50mL空試劑瓶。在該試劑瓶中加入26mL蒸餾水,18mL濃鹽酸,6mL 濃硝酸,混勻,4℃避光保存。
試劑二:粉劑×1 瓶,4℃避光保存。臨用前加46mL蒸餾水充分溶解。
試劑三:粉劑×1 瓶,4℃保存。臨用前加5.5mL蒸餾水充分溶解。
試劑四:粉劑×1 瓶,4℃保存。臨用前加2.6mL蒸餾水充分溶解。
試劑五:粉劑×1 瓶,4℃保存。臨用前加13mL蒸餾水充分溶解。
試劑六:粉劑×1 瓶,4℃避光保存。臨用前加50mL三氯甲烷充分溶解。
S-Hg 測定操作:
1. 分光光度計預(yù)熱30min,調(diào)節(jié)波長到490nm,三氯甲烷調(diào)零。
2. 樣品管:風干的土壤,過100目篩后精確稱取0.1g左右,裝入EP管;加入1 mL試劑一,充分混勻后沸水浴消化60min。取出冷卻后室溫8000g 離心10min, 吸取100μL上清液加入 新的EP管(≥2.5 mL);再先后加入900μL 蒸餾水和100μL 濃硫酸,混勻;最后加入900μL試劑二,混勻后40℃水浴24h,期間震蕩數(shù)次。
3. 標準管:取EP管,加入100μL標準液,900μL蒸餾水和100μL濃硫酸,混勻;最后加入900μL試劑二,混勻后40℃水浴24h,期間震蕩數(shù)次。
4. 于樣品管和標準管分別加入100μL試劑三,震蕩至無色;開蓋靜置30min,期間搖蕩數(shù)次,以排出氣體。
5. 加入50μL試劑四,充分混勻后靜置5min;加入250μL試劑五,蓋緊后震蕩至少1min,
靜置10min以分層。
6. 心吸取100μL下層溶液,加入1mL試劑六,震蕩使無色,靜置10 min以分層。
7. 小心吸取700μL下層溶液,加入1mL玻璃比色皿,于490nm 處比色,記錄各管吸光值。分別記為A樣品管和A標準管。
注意:標準管只需測定一次。
S-Hg 濃度計算公式:
S-Hg(n mol Hg/g)= [C 標×A 測定管÷A 標準管]×V 總÷V 樣÷W
= 40×A 測定管÷A 標準管÷W
C 標:標準液濃度,4 nmol/mL Hg;V 總:上清液總體積,1mL;W:土樣質(zhì)量,g;V 樣:加入上清液體積,100μL=0.1mL。
注意事項:
1、試劑一有刺激性氣味,易揮發(fā),實驗過程中應(yīng)注意佩戴口罩和手套,使用完立即蓋好蓋
子,以免試劑不夠;
2、測定過程中需加入濃硫酸,加濃硫酸時需注意,避免濺到皮膚或眼睛上;
3、靜置分層后,用 1mL移液槍,排除空氣后,輕輕插入下層溶液中,緩慢吸取下層溶液。