血漿經(jīng)稀釋后,加入弱酸是pH下降至4.5時,優(yōu)球蛋白組成會沉淀下來,經(jīng)離心后可去除纖溶抑制物,沉淀的的優(yōu)球蛋白組分中含有纖維蛋白原、纖溶酶原以及纖溶酶原激活物等,將上述沉淀物溶解于緩沖液后,加入氯化鈣使其凝固,置于37C觀察凝塊完全溶解所需時間。
雅吉生物優(yōu)球蛋白溶解時間(ELT)檢測試劑盒(加鈣法)主要用于觀察纖溶系統(tǒng)總的活性,是纖溶系統(tǒng)活性的篩選實驗。
該試劑盒僅用于科研領(lǐng)域,不適用于臨床診斷或其他用途。
操作步驟(僅供參考)∶
1、制備待檢血漿︰取新鮮待測靜脈血2ml,與檸檬酸鈉抗凝劑(109mM)按9:1混合,輕輕混勻,3000g 離心10min,收集上層液(缺乏血小板的血漿),轉(zhuǎn)移至塑料試管或離心管;同時應(yīng)設(shè)正常對照血漿。
2、取尖底離心管,加入7.5ml蒸餾水和0.12ml Acidic Buffer,混勻,置于冰水浴。
3、取0.5ml血漿加至冰浴中的離心管,混勻,繼續(xù)冰浴10min,使優(yōu)球蛋白充分析出。
4、3000g離心5min,棄上清,倒置離心管于濾紙上,吸去殘余液體。
5、取0.5ml硼酸鹽緩沖液加至沉淀,置于37C水浴,輕輕攪拌使之完全溶解。6、加入0.5mlCaClz溶液,立刻計時。
7、置于37℃水浴中,觀察凝血塊完全溶解,并記錄時間。
參考區(qū)間:溶解時間一般大于120min,如果小于90min為異常。
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