注意：正式測(cè)定之前選擇 2-3 個(gè)預(yù)期差異大的樣本做預(yù)測(cè)定。
土壤全硼測(cè)試盒測(cè)定意義
硼是植物生長(zhǎng)發(fā)育必需的七種微量營(yíng)養(yǎng)元素之一，土壤中硼素的含量高低直接影響著植物的
生長(zhǎng)狀況。
測(cè)定原理
硼與甲亞胺在弱酸條件下形成棕黃色配合物，在 420nm 有特征吸收峰。
自備實(shí)驗(yàn)用品及儀器
天平、常溫離心機(jī)、可見分光光度計(jì)/酶標(biāo)儀、微量石英比色皿/96 孔板。
試劑組成和配制
提取劑：粉劑×1 瓶，4℃保存。
提取液：液體 100mL×4 瓶，4℃保存。
試劑一：液體 8mL×1 瓶，4℃保存。
試劑二：粉劑×1 瓶，4℃避光保存。臨用前加 4mL 蒸餾水溶解。
樣本處理
新鮮土樣風(fēng)干，過 100 目篩，按照土壤質(zhì)量（g）：提取劑質(zhì)量(g)為 1：4 的比例（建議稱取
約 0.1g 土樣，加入 0.4g 提取劑）緩慢加入提取劑于坩堝中，邊加邊攪拌均勻，然后在馬弗
爐中 550℃熔融 10min，然后在 920℃熔融 30min，趁熱取出坩堝，將熔融物轉(zhuǎn)入燒杯，邊
攪拌邊加 4mL 提取液，必要時(shí)加蓋，防止溶液濺出，溶解 30min 后，5000g ，25℃離心 10min，
取上清液待測(cè)。
測(cè)定操作表
空白管 測(cè)定管
樣本（μL） 40
試劑一（μL） 80 80
試劑二（μL） 40 40
H2O（μL） 80 40
充分混勻，25℃黑暗中靜置 1h
于微量石英比色皿/96 孔板，蒸餾水調(diào)零，測(cè)定 420nm 處吸光值 A，分別記為 A 空白
管和 A 測(cè)定管，△A=A 測(cè)定管-A 空白管
計(jì)算公式
a. 用微量石英比色皿測(cè)定的計(jì)算公式如下
標(biāo)準(zhǔn)曲線：y = 0.3897x - 0.2359，R² = 0.9995
全硼含量（mg/kg）=（△A+0.2359）÷ 0.3897×V 反總÷（W×V 樣÷V 樣總）
= 51.32×（△A+0.2359）÷W
V 反總：反應(yīng)總體積，0.2mL；V 樣：反應(yīng)體系中加入樣本體積，0.04mL；V 樣總：加入提
取液體積，4mL，W：樣本質(zhì)量，g
b. 用 96 孔板測(cè)定的計(jì)算公式如下
標(biāo)準(zhǔn)曲線：y = 0.1949x - 0.2359，R² = 0.9995
全硼含量（mg/kg）=（△A+0.2359）÷ 0.1949×V 反總÷（W×V 樣÷V 樣總）
=102.64×（△A+0.2359）÷W
V 反總：反應(yīng)總體積，0.2mL；V 樣：反應(yīng)體系中加入樣本體積，0.04mL；V 樣總：加入提
取液體積，4mL，W：樣本質(zhì)量，g
注意事項(xiàng)
1. 配制好的試劑二 4℃保存不可超過 7 天。
2. 顯色時(shí)嚴(yán)格控制溫度并且避光，以免顯色劑見光分解。
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