正式測定前務(wù)必取 2-3 個預(yù)期差異較大的樣本做預(yù)測定
土壤酸性轉(zhuǎn)化酶試劑盒微量法測定意義：
S-AI 在 pH 為 4.5~5.0（酸性）條件下催化蔗糖不可逆地分解為果糖和葡萄糖，是土壤
微生物蔗糖代謝關(guān)鍵酶之一。
測定原理：
S-AI 催化蔗糖降解產(chǎn)生還原糖，進一步與 3,5－二硝基水楊酸反應(yīng)，生成棕紅色氨基化
合物，在 510nm 有特征光吸收，在一定范圍內(nèi) 510nm 光吸收增加速率與 AI 活性成正比。
自備用品：
可見分光光度計/酶標(biāo)儀、臺式離心機、水浴鍋、移液器、微量石英比色皿/96 孔板、研缽、
冰和蒸餾水。
試劑組成和配制：
試劑一：液體 50mL×1 瓶，4℃保存;
試劑二：粉劑×1 瓶，4℃保存；臨用前加入 25mL 試劑一充分溶解備用；用不完的試劑 4℃
保存;
試劑三：液體 10mL×1 瓶，4℃保存；
測定步驟和加樣表：
試劑名稱（μL） 測定管 對照管
風(fēng)干土樣（g） 0.05 0.05
試劑一 400
試劑二 400
混勻， 37℃準(zhǔn)確水浴 30min 后，95℃水浴 10min（蓋緊，以防水分散失），流水冷卻后
充分混勻（以保證濃度不變），10000g 25℃離心 10min，取上清液
上清液 200 200
試劑三 100 100
混勻，95℃水浴 10min（蓋緊，以防止水分散失），流水冷卻后充分混勻， 510nm 處，記錄
各管吸光值 A，如果吸光值大于 2，可以用蒸餾水稀釋后測定(計算公式中乘以相應(yīng)稀釋倍
數(shù))，ΔA=A 測定-A 對照。
S-AI 活性計算：
a.用微量石英比色皿測定的計算公式如下
標(biāo)準(zhǔn)條件下測定的回歸方程為 y = 0.0016x -0.001；x 為標(biāo)準(zhǔn)品濃度（μg/mL），y 為吸光值。
單位的定義：每天每 g 土樣中產(chǎn)生 1mg 還原糖定義為一個 S-AI 活力單位。
S-AI 活力（mg/d /g 土樣）＝[(ΔA +0.001) ÷0.0016×V 反總÷W÷T ÷1000=240×(ΔA+0.001)
V 反總：反應(yīng)體系總體積：0.4mL；T：反應(yīng)時間，1/48d； W：樣本質(zhì)量，0.05g；1mg=1000μg。
b.用 96 孔板測定的計算公式如下
標(biāo)準(zhǔn)條件下測定的回歸方程為 y = 0.0008x -0.001；x 為標(biāo)準(zhǔn)品濃度（μg/mL），y 為吸光值。
單位的定義：每天每 g 土樣中產(chǎn)生 1mg 還原糖定義為一個 S-AI 活力單位。
S-AI 活力（mg/d/g 土樣）＝[(ΔA +0.001) ÷0.0008×V 反總÷W÷T ÷1000=480×(ΔA+0.001)
V 反總：反應(yīng)體系總體積：0.4mL；T：反應(yīng)時間，1/48d； W：樣本質(zhì)量，0.05g；1mg=1000μg。
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