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動(dòng)物組織RNA穩(wěn)定保存液

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 動(dòng)物組織RNA穩(wěn)定保存液(RNALater™ RNA Stabilization Reagent for Animal Tissue),簡(jiǎn)稱試劑或,是一種用于采集動(dòng)物組織時(shí),僅需室溫操作,即可迅速抑制RNase并穩(wěn)定保存組織樣品中RNA的無毒無害液態(tài)試劑。本產(chǎn)品廣泛用于新鮮動(dòng)物組織樣品或細(xì)胞樣品中RNA的穩(wěn)定與保存。

本產(chǎn)品使用范圍廣。本產(chǎn)品能夠用于各種動(dòng)物組織樣品中RNA的穩(wěn)定和保存,如肝臟、腦、肺、脾臟、腎臟、心臟、肌肉、骨組織等,也可用于培養(yǎng)細(xì)胞、真菌、細(xì)菌、血液以及某些植物樣品的保存。
本產(chǎn)品的效果和液氮凍存的效果一致。本產(chǎn)品可以迅速滲透到組織內(nèi)部,完全抑制RNase,避免RNA降解,保持組織RNA的完整性,從而完美保存組織中的基因表達(dá)譜,并且和液氮一樣可以長期保存樣品中的RNA。
本產(chǎn)品安全便捷。本產(chǎn)品無任何毒性和刺激性,可室溫使用,確保了使用時(shí)的安全和便捷。和使用液氮相比,可以有效避免因使用超低溫的液氮而引起的凍傷、離心管爆裂等安全隱患,并且攜帶、運(yùn)輸非常方便。
本產(chǎn)品適用于普通新鮮組織或細(xì)胞樣品中RNA的穩(wěn)定和保存,更加適合樣品收集后不能夠立即進(jìn)行RNA抽提(包括miRNA等小RNA)的情況,特別適用于野外或臨床采集的樣品、大批量采集的動(dòng)物組織樣品和不能立即凍存樣品的RNA穩(wěn)定與保存。
在本產(chǎn)品中樣品的保存時(shí)間和存儲(chǔ)溫度相關(guān),例如37℃可保存1-2天,室溫可保存一周,4℃可以保存1個(gè)月,-20℃或更低溫度可以長期保存。具體如下表所示:

存儲(chǔ)溫度 37℃ 25℃ 4℃ -20℃ -80℃
保存時(shí)間 1-2天 1周 1個(gè)月 3-5年 5年

使用本產(chǎn)品在-20℃或-80℃凍存的樣品,反復(fù)凍融3-5次不會(huì)顯著影響RNA的質(zhì)量。通常情況下,推薦把本產(chǎn)品保存的樣品在室溫或4℃運(yùn)輸或短期存放,-20℃或-80℃長期存放。如果希望-20℃或-80℃長期存放,必須先4℃存放過夜或更長時(shí)間后,才能轉(zhuǎn)移到更低溫度存放。
本產(chǎn)品對(duì)于小鼠組織和HeLa細(xì)胞樣品的保存效果如圖1所示。組織和細(xì)胞用RNALater™分別在4℃保存1個(gè)月、室溫保存1周以及37℃保存1天后,抽提獲得的RNA與新鮮樣品一樣均能夠保持完整性;而用PBS在37℃保存1天后,大部分RNA都已經(jīng)被降解。

圖1. RNALater™對(duì)于小鼠組織和HeLa細(xì)胞中RNA的穩(wěn)定保存效果。按照?qǐng)D中相應(yīng)條件保存后,利用RNAeasy™動(dòng)物RNA抽提試劑盒(離心柱式)抽提RNA,隨后取相同體積的RNA樣品變性處理后,在含6.67%甲醛和適量NA-Red的1.2%變性瓊脂糖凝膠中進(jìn)行電泳檢測(cè)。

本產(chǎn)品保存的組織樣品能用常規(guī)的RNA抽提方法進(jìn)行RNA抽提,如Trizol法和離心柱法等,特別適用于RNAeasy™動(dòng)物RNA抽提試劑盒(離心柱式)。使用時(shí)直接將樣品從RNALater™中取出當(dāng)作普通的新鮮或凍存的樣品即可,少量殘留的RNALater™試劑不會(huì)影響后續(xù)抽提效果。
本產(chǎn)品也可用于組織中蛋白和DNA的穩(wěn)定和保存,但RNALater™會(huì)導(dǎo)致蛋白變性,后續(xù)可進(jìn)行Western Blot、SDS-PAGE等實(shí)驗(yàn),而不適用于檢測(cè)酶活力等須保持蛋白活性的實(shí)驗(yàn)。如需保持蛋白酶活力,可以選用AllProtect™動(dòng)物組織核酸、蛋白穩(wěn)定保存液(R0121)。樣品從RNALater™中取出后可直接當(dāng)作新鮮或凍存的樣品按照常規(guī)方法進(jìn)行蛋白提取。
本產(chǎn)品100ml可以用于約100-200個(gè)重量為100mg樣品的保存,本產(chǎn)品500ml可以用于約500-1000個(gè)重量為100mg樣品的保存。
包裝清單:

產(chǎn)品編號(hào) 產(chǎn)品名稱  包裝 
R0118-100ml RNALater™動(dòng)物組織RNA穩(wěn)定保存液 100ml
R0118-500ml RNALater™動(dòng)物組織RNA穩(wěn)定保存液 500ml
說明書 1份

保存條件:
室溫或4℃保存,2年有效。
注意事項(xiàng):
實(shí)驗(yàn)中獲得的組織樣品適當(dāng)處理大小后,應(yīng)迅速并完全浸泡在RNALater™試劑中。
本產(chǎn)品適用于新鮮動(dòng)物組織樣品或細(xì)胞中RNA的穩(wěn)定與保存。樣品凍存后再用RNALater™保存的效果會(huì)比直接將新鮮樣品用RNALater™保存差很多。本產(chǎn)品盡管對(duì)于凍存的樣品也有一定的穩(wěn)定保存作用,但更適合新鮮樣品。
用本產(chǎn)品保存后,樣品可能會(huì)變得微硬,為正,F(xiàn)象,不會(huì)影響后續(xù)RNA抽提時(shí)組織的勻漿、裂解等操作。
樣品如果需要-20℃或-80℃長期保存,應(yīng)4℃保存過夜或更長時(shí)間后才能再轉(zhuǎn)移至-20℃或-80℃保存,以保證RNALater™試劑更加充分有效地完全浸入組織內(nèi)部。
-20℃或-80℃保存情況下,樣品解凍時(shí)RNALater™試劑中可能有結(jié)晶析出,屬正,F(xiàn)象,可待結(jié)晶完全溶解后使用,不會(huì)影響后續(xù)RNA的抽提效果。
血液白細(xì)胞樣品按照常規(guī)方法分離后,可以參考細(xì)胞樣品的方法進(jìn)行保存。
用于植物樣品保存時(shí),應(yīng)當(dāng)去除表面蠟質(zhì),確保RNALater™試劑能充分進(jìn)入組織內(nèi)部。
本產(chǎn)品僅限于專業(yè)人員的科學(xué)研究用,不得用于臨床診斷或治療,不得用于食品或藥品,不得存放于普通住宅內(nèi)。
為了您的安全和健康,請(qǐng)穿實(shí)驗(yàn)服并戴一次性手套操作。
使用說明:
1. 對(duì)于組織樣品:
a. 保存:將組織剪切成長寬高均不大于0.5厘米的組織塊,迅速完全浸泡于5-10倍體積RNALater™試劑中(例如100mg組織需約0.5-1ml RNALater™試劑),此時(shí)室溫可以保存一周,4℃可以保存一個(gè)月,4℃至少保存過夜后可以在-20℃或-80℃保存3-5年。組織塊過大時(shí),RNALater™試劑會(huì)出現(xiàn)不易充分滲透到組織中心處的問題,導(dǎo)致未充分滲透處RNA出現(xiàn)一定程度的降解。
b. RNA抽提時(shí)樣品的處理:用潔凈的鑷子將組織塊從RNALater™試劑中取出,紙巾吸除表面殘液,迅速置于適當(dāng)裂解液中進(jìn)行勻漿或液氮中進(jìn)行研磨操作。后續(xù)即可采用離心柱法或Trizol等進(jìn)行RNA抽提操作。
2. 對(duì)于細(xì)胞等樣品:
a. 保存:收集的新鮮細(xì)胞樣品用PBS洗滌后,5000g離心1-2分鐘,吸除PBS后小心加入5-10倍體積RNALater™試劑,避免將細(xì)胞沖起,然后置于相應(yīng)溫度條件下保存?zhèn)溆谩?/span>
注意:盡量保持細(xì)胞樣品處于緊實(shí)狀態(tài),避免細(xì)胞重懸,否則可能會(huì)對(duì)后續(xù)RNA得率有一些影響。對(duì)白細(xì)胞、細(xì)菌、真菌樣品進(jìn)行保存時(shí),請(qǐng)參考細(xì)胞的方法進(jìn)行。
b. RNA抽提時(shí)樣品的處理:加入與RNALater™試劑等體積的PBS或DEPC水,10,000g離心1分鐘收集細(xì)胞樣品,小心吸除上清液,后續(xù)即可采用離心柱法或Trizol進(jìn)行RNA抽提操作。當(dāng)保存樣品的RNALater™試劑的體積小于100μl時(shí),可以直接加入RNAeasy™動(dòng)物RNA抽提試劑盒(離心柱式)中的裂解液300μl,當(dāng)RNALater™試劑的體積在100-200μl之間時(shí)可以直接加入600μl裂解液,隨后按照試劑盒的操作步驟提取總RNA。

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