白色念珠菌 PCR 試劑盒（Canidia albicans）又叫白假絲酵母菌是一種真菌，通常存在于正常人口腔，上呼吸道，腸道及陰道，一般在正常機(jī)體中數(shù)量少，不引起疾病，當(dāng)機(jī)體免疫功能或一般防御力下降或正常菌群相互制約作用失調(diào)，則本菌大量繁殖并改變生長形式（芽生菌絲相）侵入細(xì)胞引起疾病。其中包括皮膚念珠菌病（好發(fā)于皮膚皺褶處，皮膚潮紅、潮濕、發(fā)亮，有時蓋上一層白色或呈破裂狀物，病變周圍有小水泡）、粘膜念珠菌�。ㄒ赠Z口瘡、口角炎、陰道炎最多見）、內(nèi)臟及中樞神經(jīng)念珠菌病（可由粘膜皮膚等處病菌播散引起，有肺炎 腸胃炎、心內(nèi)膜炎、腦膜炎、腦炎等，偶爾也可發(fā)生敗血癥）。因此快速靈敏檢測梭狀芽孢桿菌具有重要的意義，本試劑盒就是為此目的根據(jù) PCR 原理開發(fā)， 它具有下列特點(diǎn)：
1. 即開即用，用戶只需要提供細(xì)菌 DNA 模板。
2. 引物經(jīng)過精心優(yōu)化，專一性強(qiáng)，只擴(kuò)增白色念珠菌 DNA。
3. 提供陽性對照，便于區(qū)分假陰性樣品。
4. PCR mix 中含上樣染料，PCR 后可以直接上樣電泳。
5. 本試劑盒足夠做 40μL 體系的PCR 50 次。
本產(chǎn)品只能用于科研。
| 成份 | 編號 | 十孔盒包裝 |
| PCR MagicMix 3.0 | 90805 | 1 mL（紅蓋） |
| 超純水 | 100935 | 1 mL（亮黃蓋） |
| 白色念珠菌 PCR 引物混合液 | 13-60210yw | 100 μL（白蓋） |
| 白色念珠菌 PCR 陽性對照 （1×10E8 拷貝/μL） | 13-60210pc | 50 μL（黃蓋） |
| 天凈沙核酸釋放劑試用裝 | 61202 | 20 次（1mL、綠蓋） |
| 使用手冊 | 13-60210sc | 1 份 |
低溫運(yùn)輸，-20℃保存，保存期限為一年。陽性對照需要單獨(dú)放置，不要污染其
他試劑。
一、樣品 DNA 的制備
1. 如果有 N 個樣品，必須設(shè)置 N+2 個提取，多出的一個是PC（樣品制備陽性對照），一個是 NC（樣品制備陰性對照）�？梢杂� 10μL 陽性對照的 100 倍稀釋液再加上一定量的水使總體積跟每次制備要求的體積一樣，以此作為 PC。另外用水作為 NC
2. 用自選方法純化樣品的 DNA，本試劑盒跟市場上大多數(shù)細(xì)菌 DNA 提取試劑盒兼容。也可以選購本公司的細(xì)菌 DNAout 或柱式細(xì)菌 DNAout。本試劑盒免費(fèi)贈送 20 次免 DNA 提取的天凈沙核酸釋放劑，本產(chǎn)品的裂解液可以直接作為 PCR 模板，省略了 DNA 提取步驟。
二、設(shè)置 PCR 反應(yīng)（40 μL 體系）
對 N+2 個樣品，在PCR 時需要增加一個 PCR 陽性對照和一個 PCR 陰性對照，故需要設(shè)置 N+4 個反應(yīng)。在 N+4 個PCR 管中分別加入下列成分
成分N+2 個PCR 陰性PCR 陽性
樣品管對照對照
PCR MagicMix 3.0 各 20 μL 20 μL 20 μL白色念珠菌 PCR 引物混合液 各 2 μL 2 μL 2 μL N+2 個樣品 DNA 模板各 18 μL - -
樣品制備陰性對照（超純水） - 18 μL -
樣品制備陽性對照（白色念珠菌 -- 18 μL陽性對照的 10000 倍稀釋液）
2. 按下表設(shè)置 PCR 反應(yīng)：
三、電泳檢測
2. 取 10-20 μL PCR 產(chǎn)物。電泳檢測 PCR 產(chǎn)物。本產(chǎn)品提供的 PCR Mix在擴(kuò)增結(jié)束后可以直接上樣，不需要另外再加 loading buffer。預(yù)期的 PCR產(chǎn)物長度為 263bp。陽性對照必須有此條帶出現(xiàn)，陰性對照必須無任何擴(kuò)增，否則實(shí)驗(yàn)無效。對沒有擴(kuò)增產(chǎn)物的樣品，可以稀釋 10 倍后重復(fù) PCR
擴(kuò)增以排除 PCR 抑制劑的感染。
