偽狂犬病病毒PCR試劑盒(Pseudorabies Virus，PrV)又稱豬皰疹病毒Ⅰ型、傳染性延髓麻痹病毒、奇癢癥病毒、奧葉茲基氏病病毒。是引起牛、羊、豬、犬和貓等多種家畜和野生動(dòng)物發(fā)熱、奇癢（豬除外）及腦脊髓炎為主要癥狀的皰疹病毒。由于本病的臨床癥狀類似狂犬病，故也用“偽狂犬病”這一病名。偽狂犬病與狂犬病毒并沒有關(guān)系，而是屬于皰疹病毒。因此快速靈敏檢測(cè)偽狂犬病病毒具有重要意義。本產(chǎn)品就是為此目的根據(jù) PCR 原理開發(fā)的試劑盒，它具有下列特點(diǎn)：
1. 即開即用，用戶只需要提供 DNA 模板。
2. 引物經(jīng)過精心優(yōu)化，專一性強(qiáng)，只擴(kuò)增偽狂犬病病毒，與其他微生物沒有交叉反應(yīng)。
3. 提供陽性對(duì)照，便于區(qū)分假陰性樣品。
4. PCR mix 中含上樣染料，PCR 后可以直接上樣電泳。
本試劑盒足夠做 40μL 體系的PCR 50 次，但只能用于科研。
| 成份 | 編號(hào) | 十孔盒包裝 |
| PCR MagicMix 3.0 | 90805 | 1 mL（紅蓋） |
| 超純水 | 100935 | 1 mL（亮黃色） |
| 偽狂犬病病毒PCR 引物混合液 | 同 13-35100yw | 100 μL（白蓋） |
| 偽狂犬病病毒PCR 陽性對(duì)照 （1×10E8 拷貝/μL） | 同 60908-35100pc | 50 μL（黃蓋） |
| 天凈沙核酸釋放劑（試用裝） | 61202 | 20 次（1 mL，綠蓋） |
| 使用手冊(cè) | 同 13-35100sc | 1 份 |
低溫運(yùn)輸，-20℃保存，保存期限為一年。陽性對(duì)照需要單獨(dú)放置，不要污染其
他試劑
樣品 DNA
一、樣品 DNA 的制備
1. 用自選方法純化 N+2 個(gè)樣品的 DNA，本試劑盒跟市場(chǎng)上大多數(shù)核酸提取試劑盒兼容。本試劑盒免費(fèi)贈(zèng)送 20 次天凈沙核酸釋放劑試用裝，其使用手冊(cè)可以從本公司網(wǎng)站天凈沙核酸釋放劑或產(chǎn)品編號(hào) 61202 下載。
2. 如果有 N 個(gè)樣品，則需要做 N+2 個(gè)提取，包括一個(gè)樣品制備陽性對(duì)照和一個(gè)樣品制備陰性對(duì)照。樣品制備陽性對(duì)照是在適量水（取決于試劑盒要求的樣品起始量）中加 10μL PCR 陽性對(duì)照的 1000 倍稀釋液而得，樣品
制備陰性對(duì)照是直接用水。提取結(jié)束后最后得到模板 DNA 放冰上待用
二、設(shè)置PCR 反應(yīng)（40μL 體系）
3. 對(duì) N+2 個(gè)樣品，在PCR 時(shí)需要增加一個(gè) PCR 陽性對(duì)照和一個(gè) PCR 陰性對(duì)照，故需要設(shè)置 N+4 個(gè)反應(yīng)。在 N+4 個(gè)PCR 管中分別加入下列成分：
成分N+2 個(gè)PCR 陰性PCR 陽性
樣品管對(duì)照對(duì)照
PCR MagicMix 3.0各 20 μL20 μL20 μL
偽狂犬病病毒 PCR 引物各 2 μL2 μL2 μL混合液
N+2 個(gè)樣品 DNA 模板各 18 μL--
PCR 陰性對(duì)照（水）-18 μL-
PCR 陽性對(duì)照（偽狂犬病
病毒 PCR 陽性對(duì)照的--18 μL 1000 倍稀釋液）
4. 按下表設(shè)置 PCR 反應(yīng)：
、電泳檢測(cè)
取 10-20 μL PCR 產(chǎn)物。電泳檢測(cè) PCR 產(chǎn)物。本產(chǎn)品提供的 PCR Mix在擴(kuò)增結(jié)束后可以直接上樣，不需要另外再加 loading buffer。預(yù)期的 PCR產(chǎn)物長(zhǎng)度為 100bp。陽性對(duì)照必須有條帶出現(xiàn)，陰性對(duì)照必須無任何擴(kuò)增， 否則實(shí)驗(yàn)無效。對(duì)沒有擴(kuò)增產(chǎn)物的樣品，可以稀釋 10 倍后重復(fù) PCR 擴(kuò)增以排除 PCR 抑制劑的感染。
