保存條件
收到TIANexact基因分型PCR試劑 (探針法)后， 請(qǐng)立即置于-20℃ 避光保存，在該條件下避光可保存2年。從-20℃ 取出使用時(shí)，將凍存的2×TIANexact Genotyping PreMix (Probe)和50×ROX Reference Dye
溶解，然后輕輕顛倒混勻，待溶液完全均一后再行使用。如解凍后沒有使用，須徹底混勻后重新冷凍(在解凍過(guò)程中鹽會(huì)出現(xiàn)分層現(xiàn)象，未混勻進(jìn)行冷凍，鹽晶體的析出將會(huì)對(duì)酶造成損害)。如需一段時(shí)間內(nèi)經(jīng)常取用，可在2～8℃條件下儲(chǔ)存3個(gè)月。避免反復(fù)多次凍融。
產(chǎn)品簡(jiǎn)介
TIANexact Genotyping qPCR PreMix（Probe）是一款專門應(yīng)用于探針法SNP檢測(cè)的即用型2×濃度的熱啟動(dòng)PCR預(yù)混試劑。該預(yù)混試劑含有特異的抗體修飾Taq DNA聚合酶，能有效檢測(cè)低豐度的DNA模板。精心配制的獨(dú)特PCR緩沖液能有效消除眾多PCR抑制劑對(duì)PCR的抑制及對(duì)熒光信號(hào)淬滅的影響，對(duì)SNP鑒定有很好的特異性和擴(kuò)增效率。
試劑盒特點(diǎn)
1. 防彈式基因分型---輕松屏蔽PCR抑制劑對(duì)SNP分型的影響
2. 快速反應(yīng)----對(duì)多數(shù)實(shí)驗(yàn)?zāi)軌驁?zhí)行快速PCR操作
3. 熒光信號(hào)強(qiáng)----強(qiáng)勁的SNP分型僅需少量的引物探針
4. 避免操作失誤----添加藍(lán)色指示染料，監(jiān)控實(shí)驗(yàn)添加過(guò)程
試劑盒原理
1. TIANexact基因分型PCR試劑 (探針法)適用于水解探針法進(jìn)行模板的熒光定量PCR和SNP檢測(cè)，該產(chǎn)品可以克服PCR反應(yīng)液中的抑制因子，特別是對(duì)粗提樣本，其表現(xiàn)出高度的抗逆性。適用于植物，動(dòng)物，以及一些環(huán)境樣本的粗提液。
2. 2×TIANexact Genotyping PreMix (Probe)中特異的抗體修飾熱啟動(dòng)Taq DNA聚合酶，95℃條件下僅需2~5分鐘即可激活全部酶活，減少了反應(yīng)時(shí)間，同時(shí)也充分的減少PCR擴(kuò)增全程中的非特異性擴(kuò)增，配合精心優(yōu)化的buffer體系，使該產(chǎn)品對(duì)于序列變異的鑒定有很好的特異性和擴(kuò)增效率。
3. 2 × TIANexact Genotyping PreMix (Probe)包含dNTPs，增強(qiáng)劑，穩(wěn)定劑等以提高產(chǎn)物特異性和反應(yīng)靈敏度，并包含一種微藍(lán)色的指示染料，該染料對(duì)PCR反應(yīng)以及探針熒光沒有任何影響；使操作更加方便，避免大量樣本小體系（10 μl體系）操作過(guò)程中容易產(chǎn)生的加樣錯(cuò)誤。
注意事項(xiàng)
1．如果試劑沒有混勻，其反應(yīng)性能會(huì)有所下降。使用時(shí)請(qǐng)上下顛倒輕輕混勻，請(qǐng)不要使用振蕩器進(jìn)行混勻，盡量避免出現(xiàn)泡沫，并經(jīng)瞬時(shí)離心后使用。
2．本產(chǎn)品中不含有熒光探針。
3．引物終濃度為0.3 μM，探針終濃度為0.2 μM可以在大多數(shù)體系中獲得良好的擴(kuò)增結(jié)果。 需要進(jìn)一步優(yōu)化引物濃度的，可以在0.1-0.9 μM范圍內(nèi)調(diào)整；需要進(jìn)一步優(yōu)化探針濃度的，可以在0.1-0.25 nM范圍內(nèi)調(diào)整。
4．20 μl反應(yīng)體系中，基因組DNA模板的使用量一般小于100 ng。
