檢測: | 報告基因酶、熒光素酶報告基因檢測 |
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適用細胞: | 哺乳動物細胞 |
檢測方法: | 生物發(fā)光 |
適用于(設(shè)備): | 化學(xué)發(fā)光酶標(biāo)儀(微孔板) |
產(chǎn)品規(guī)格: | 384 孔板、96 孔板 |
標(biāo)簽類型: | 酶標(biāo)記 |
產(chǎn)品線: | Pierce™ |
底物: | Vargulin(海螢熒光素酶) |
底物屬性: | 化學(xué)底物 |
底物類型: | 熒光素酶底物 |
目標(biāo)酶: | 熒光素酶、海螢熒光素酶 |
技術(shù): | 增強的化學(xué)發(fā)光法 |
數(shù)量: | 100 rxn 試劑盒 |
海螢輝光測定緩沖液,5 mL,在 4°C 下儲存
• Vargulin (1X),5 µL,在 -20°C 下儲存
• 2X 細胞裂解緩沖液,6 mL,在室溫下儲存
接收后,在 -20°C 下儲存試劑盒或按上文所述儲存單一組分。
描述
Thermo Scientific Pierce 海螢熒光素酶輝光檢測試劑盒在海螢熒光素酶報告基因存在的情況下提供極其明亮且穩(wěn)定的生物發(fā)光信號(半衰期大于 1 小時)。
海螢熒光素酶輝光檢測試劑盒的特點:
•靈敏—對海螢熒光素酶活性進行高度靈敏的檢測
• 分泌熒光素酶—在不破壞細胞的前提下支持實時測定和動力學(xué)研究
• 穩(wěn)定—與閃光測定相比,試劑可提供更高的信號穩(wěn)定性
• 簡單—不需要配備進樣器的光度計
• 兼容—與其他海螢 或 Vargula 熒光素酶兼容的測定試劑
• 適合自動化—適合用于高通量測定
• 便利—包含一種通用的細胞裂解緩沖液和經(jīng)過優(yōu)化的輝光測定試劑
• 安全—允許用戶執(zhí)行非放射性測定
該 Pierce 熒光素酶輝光檢測試劑盒包含的試劑用于測定哺乳動物細胞培養(yǎng)基和裂解物中海螢熒光素酶的活性。當(dāng)與 Thermo Scientific 海螢 Luc 載體一起使用時,該試劑盒提供了一個非常靈敏的生物發(fā)光報告基因測定系統(tǒng),用于對熒光素酶活性進行分泌或細胞內(nèi)檢測。熒光素酶反應(yīng)產(chǎn)生的光輸出可與生成的熒光素酶蛋白的量相關(guān),后者又與驅(qū)動熒光素酶表達的啟動子的活性成正比。該試劑盒可用于檢測使用 Vargulin 作為底物的任何海螢熒光素酶或衍生物的活性。
包括:
細胞裂解緩沖液、反應(yīng)緩沖液和底物
需要:
海螢熒光素酶和光度計或其他能夠監(jiān)測發(fā)光的儀器(如 Thermo Scientific Luminoskan Ascent 和 Varioskan 閃光酶標(biāo)儀)。
應(yīng)用:
• 用于分析順式調(diào)節(jié)元素和反式作用因子的啟動子研究
• 藥物篩選
• siRNA 和 miRNA 篩選
• 研究脫靶效應(yīng)的多通路測定
• 分泌通路/蛋白定位報告基因測定
• 信號轉(zhuǎn)導(dǎo)通路分析
• RNA 剪接研究
海螢熒光素酶是來自海洋介形亞綱動物海螢夜光蟲的 61kDa 蛋白。海螢熒光素酶在細胞培養(yǎng)基中高度分泌,可對報告基因活性進行活細胞監(jiān)測。使用光度計捕獲的光輸出可與生成的海螢熒光素酶蛋白的量相關(guān),并可用于確定驅(qū)動海螢表達的啟動子的活性。Thermo Scientific 海螢 Luc 載體中的海螢基因針對哺乳動物細胞中的表達進行了修飾,并利用檢測試劑盒提供較優(yōu)性能。海螢輝光試劑可產(chǎn)生輝光型動力學(xué)的海螢熒光素酶反應(yīng),并推薦用于不配備進樣器的光度計或需要批量處理樣品的應(yīng)用。