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TdT末端轉(zhuǎn)移酶

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TdT末端轉(zhuǎn)移酶

 

 

產(chǎn)品編號 產(chǎn)品名稱 規(guī)格 價格(元) 說明書
C5011 TdT末端轉(zhuǎn)移酶(Terminal Transferase) 500U 500
2,500U 2,000
末端轉(zhuǎn)移酶（TdT）是一種不依賴于模板的DNA聚合酶，催化脫氧核苷酸結(jié)合到DNA分子的3’羥基端。帶有突出、凹陷或平滑末端的單雙鏈DNA分子均可作為TdT的底物，加尾長度可達5~300nt。該末端轉(zhuǎn)移酶（TdT）分子量為58.3 kDa，無5’和3’核酸外切酶活性，反應(yīng)中加入Co2+可提高加尾效率。該酶廣泛用于DNA的3’末端添加同聚物、利用修飾堿基（如ddNTP，DIGdUTP）標(biāo)記DNA 3’末端、TdT介導(dǎo)的dUTP 缺口末端標(biāo)記技術(shù)（細胞凋亡的原位檢測）等試驗。該酶經(jīng)檢測無DNA內(nèi)切酶和外切酶污染，不含RNase。

組分
組分名稱 數(shù)量
Terminal Transferase (20 U/μl) 25 μl/125 μl
10×TdT Buffer 1 ml
10 mM CoCl2 250 μl

應(yīng)用
  • 寡核苷酸或DNA 3’羥基末端標(biāo)記
  • DNA末端加尾(DNA tailing)
  • 5’-RACE
  • 合成同一種脫氧核苷酸的寡聚鏈

活性定義
37℃60分鐘內(nèi)，催化1nmol dNTP加入到多聚核苷酸3’羥基末端中所需的酶量定義為1個活性單位

1×TdT Buffer
100mM KCl, 30mM Tris-acera, 0.05% (v/v) Triton X-100 (pH 7.5 at 25 °C)

儲存
-20℃可保存3年。

熱失活
75°C 20min。

注意事項
1、適量EDTA可使Terminal Transferase的活性喪失。
2、金屬離子螯合劑，較高濃度的銨根離子、氯離子、碘例子和磷酸根離子均對Terminal Transferase活性具有抑制作用。
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